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貨號 | CS-X3227 | 規格 | 5×105Cells/T25培養瓶 |
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生長特性 | 貼壁 | 組織來源 | 腦組織 |
細胞保存方法:
(一)細胞凍存
1. 配制含10%DMSO或甘油、10~20%小牛血清的凍存培養液;
2. 取對數生長期的細胞,去除舊培養液,用PBS清洗。
3. 去除PBS,加入適量(覆蓋培養皿表面)把單層生長的細胞消化下來;
4. 離心1000rpm,5min;
5. 去除,加入適量配制好的凍存培養液,用吸管輕輕吹打使細胞均勻,計數,調節凍存液中細胞的最終密度為5×106/ml~1×107/ml;
6. 將細胞分裝入凍存管中,每管1~1.5 ml;
7. 在凍存管上標明細胞的名稱,凍存時間及操作者;
8. 凍存:標準的凍存程序為降溫速率-1~-2℃/ min;當溫度達-25℃以下時,可增至-5℃~-10℃/min;到-100℃時,則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ,然后放入-70℃冰箱中過夜,取出凍存管,移入液氮容器內。
產品信息:
貨號 | CS-X3227 | 組織來源 | 腦組織 |
傳代特性 | 不增殖;不傳代 | 培養基 | 含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等 |
細胞形態 | 梭形、多角形 | 生長特性 | 貼壁 |
培養條件 | 換液頻率 | 每2-3天換液一次 |
商品介紹:
產品名稱:大鼠神經少突膠質細胞 3.產品規格:5×105cells/T25細胞培養瓶 4.細胞簡介: 大鼠神經少突膠質細胞分離自腦皮層組織;大腦分左右兩個半球,大腦皮質(灰質)覆蓋著每個大腦半球的大部分,它是神經元胞體集中的地方。內部則是由神經纖維或髓鞘構成的白質。每一個半球都有三個面,即外側面(約占整個皮質面積的1/3)、內側面和底面(占2/3的面積);半球表面有很多深淺不等的溝或裂,溝或裂之間的隆起叫回,它們大大增加了大腦的表面積;大腦外側面重要的溝、裂有大腦外側裂、頂枕裂和中央溝。由于三溝裂之界隔,使大腦皮質組分為額葉、頂葉、顳葉、枕葉四大部分。少突膠質細胞分布于中樞神經系統,在銀浸染標本中,少突膠質細胞比星狀膠質細胞小,其突起也較小而少,呈珠狀,故被稱為少突膠質細胞或寡突膠質細胞。但是用特異性免疫細胞化學染色顯示的少突膠質細胞,其突起并不少,而且還有許多分支。少突膠質細胞的主要功能是在中樞神經系統中包繞軸突、形成絕緣的髓鞘結構、協助生物電信號的跳躍式高效傳遞并維持和保護神經元的正常功能。其異常不僅會導致中樞神經系統脫髓鞘病變,還會引起神經元損傷或精神類疾病,甚至可以引發腦腫瘤。根據少突膠質細胞的分布和位置可分為三種:①束間少突膠質細胞(interfasicular-oligodendrocyte),分布在中樞神經系統的白質的神經纖維束之間;②神經細胞周少突膠質細胞(perineuronal-oligodendrocyte),分布在中樞神經系統的灰質區,常位于神經細胞周圍,與神經細胞的關系密切,故又稱為神經細胞周衛星細胞(perineuronal-satellite-cell),但在神經細胞胞體與此類細胞之間亦常有星形膠質細胞的薄片狀突起分隔;③血管周少突膠質細胞(pcrivascular-oligodendrocyte),主要分布在中樞神經系統內的血管周圍。少突膠質細胞形成的髓鞘膜是為特化和復雜動物細胞膜之一,其上有眾多跨膜蛋白和表面蛋白用以維持髓鞘的致密穩定結構。如半乳糖腦苷脂(GC),它是髓鞘的一種主要類脂,用GC抗體鑒別成熟的少突膠質細胞是一種比較早的免疫鑒定方法。近十年來,神經發育學科進展較快,更多的少突膠質細胞分子標記物被鑒定出來,如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。 5.方法簡介: 公司實驗室分離的大鼠神經少突膠質細胞采用yi蛋白酶消化、混合細胞營養缺失培養、搖床振蕩結合差速貼壁法并通過專用培養基培養篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。 6.質量檢測: 公司實驗室分離的大鼠神經少突膠質細胞經GC(Galactocerebroside)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。 7.培養信息: 包被條件 PLL(0.1mg/ml) 培養基 含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等 換液頻率 每2-3天換液一次 生長特性 貼壁 細胞形態 梭形、多角形 傳代特性 不增殖;不傳代 消化液 0.25%yi蛋白酶 培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5% |
操作步驟:
1)、冷凍前24-48小時更換半量或全量培養基,使細胞處于指數生長期。
2)、配制冷凍保存溶液(使用前配制):另取一離心管,加入培養基、血清,逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度,即制成雙倍的凍存液,置于室溫下待用。
3)、離心收集培養之細胞,用加血清的培養基重懸起細胞,取少量細胞懸浮液(約0. 1 ml)計數細胞濃度及凍前存活率。
4)、取與細胞懸液等量的凍存液,緩慢逐滴加入細胞懸液,并晃動試管,制成細胞凍存懸液(DMSO后濃度為5~10%),使細胞濃度為1~5×106cells/ ml,混合均勻,分裝于已標示之冷凍保存管中,1~2 ml/vial,并取少量細胞懸浮液作污染檢測。嚴密封口后,注明細胞名稱、代數、日期。然后進行凍存。
注意事項:
1)、欲冷凍保存之細胞應在生長良好且存活率高之狀態,約為80~90%致密度。冷凍前檢測細胞是否仍保有其性質,應在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產生。
2)、細胞在液氮中可長期凍存無,而不會影響細胞活力;在-70度可保存數月。
3)、注意冷凍保護劑之品質。DMSO應為試劑級等級,無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產品,如Sigma D-2650),以5~10 ml小體積分裝,4 ℃避光保存,勿作多次解凍。Glycerol亦應為試劑級等級,以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內使用,因長期儲存后對細胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液,可避免DMSO直接加入時釋放的熱量對細胞的損傷。緩慢逐滴加入細胞懸液是使細胞逐步適應高滲,可降低細胞受損。DMSO可能引起部分白血病細胞株的分化,可換用10%甘油凍存。
公司正在出售的產品:
小鼠脂肪干細胞 | 人甘膽suan(CG)試劑盒ELISA |
人子宮平滑肌細胞 | 人軸突生長誘向因子1(Ntn1)試劑盒elisa |
兔骨骼肌細胞 | 人蛋白mei體(prosome,macropain)亞基,β型,1(PSMB1)檢測試劑盒 |
兔肌源性干細胞 | 人Stathmin 1(STMN1)ELISA檢測試劑盒 |
兔臍帶間充質干細胞 | 本迪布焦型埃博拉病毒RT-PCR試劑盒 |
兔外周血單個核細胞 | 白色念珠菌PCR檢測試劑盒 |
兔主動脈平滑肌細胞 | 豬肺炎支原體PCR檢測試劑盒 |
小鼠表皮黑色素細胞 | 大腸彎曲桿菌、海鳥彎曲桿菌16S rRNA基因熒光PCR檢測試劑盒(探針法) |
小鼠腸平滑肌細胞 | 駱駝痘病毒PCR試劑盒 |
小鼠肺成纖維細胞 | 禽腎炎病毒2型RT-PCR試劑盒 |
小鼠肝動脈內皮細胞 | 通用/H5亞型(AIV-U/AIV-H5)核suan檢測試劑盒 |
小鼠骨髓來源內皮祖細胞 | 馬傳染性貧血(EIAV)核suan檢測試劑盒 |
小鼠鞏膜成纖維細胞 | 大鼠神經少突膠質細胞螺桿菌通用PCR試劑盒 |
小鼠頜下腺上皮細胞 | 病毒H5N2亞型PCR檢測試劑盒 |
小鼠甲狀腺濾泡上皮細胞 | 轉基因植物S基因PCR檢測試劑盒 |
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