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貨號	CS-X3256	規(guī)格	5×105Cells/T25培養(yǎng)瓶
生長特性	貼壁	組織來源	嗅球組織

細(xì)胞保存方法：

（一）細(xì)胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對數(shù)生長期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長的細(xì)胞消化下來；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

產(chǎn)品信息：

貨號	CS-X3256	組織來源	嗅球組織
傳代特性	屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群	培養(yǎng)基	含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
細(xì)胞形態(tài)	神經(jīng)元細(xì)胞樣	生長特性	貼壁
培養(yǎng)條件		換液頻率	每2-3天換液一次

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：大鼠嗅球神經(jīng)元細(xì)胞
2.組織來源：嗅球組織

3.產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

4.細(xì)胞簡介：

大鼠嗅球神經(jīng)元細(xì)胞分離自嗅球組織；嗅球是脊椎動物前腦結(jié)構(gòu)中參與嗅覺的部分，用于感知?dú)馕丁Ｐ崆蚍譃槎€(gè)不同的結(jié)構(gòu)：主嗅球及輔助嗅球。在大腦額葉來自許多嗅細(xì)胞的神經(jīng)纖維纏集在一起，形成線球狀的部分。在這里，纖維與多個(gè)次級神經(jīng)元——僧帽細(xì)胞的樹突相連接，進(jìn)而由這里伸出神經(jīng)纖維形成嗅囊，終止于額葉下方。一般認(rèn)為它在嗅味的辨別中具有重要的功能。對于大部份的脊椎動物而言，嗅球位在大腦的前面，不過人的嗅球位于大腦的內(nèi)部。嗅球由篩骨的篩板固定且保護(hù)嗅球，哺乳動物的篩板會分隔嗅球和嗅上皮，而嗅神經(jīng)會穿過篩板中的篩孔而連接到嗅球。嗅球分為二個(gè)不同的結(jié)構(gòu)：主嗅球及輔助嗅球。

5.方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠嗅球神經(jīng)元細(xì)胞采用yi蛋白酶消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質(zhì)量檢測：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠嗅球神經(jīng)元細(xì)胞經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

7.培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率每2-3天換液一次

生長特性貼壁

細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣

傳代特性屬于終末分化細(xì)胞；屬于不增殖細(xì)胞群

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養(yǎng)條件氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠嗅球神經(jīng)元細(xì)胞

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。

注意事項(xiàng)：

1）、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細(xì)胞在液氮中可長期凍存無，而不會影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級等級，無菌且無色(以0. 22micron FGLP Telflon過濾或是直接購買無菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級等級，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開啟后一年內(nèi)使用，因長期儲存后對細(xì)胞會有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠胰腺腺泡細(xì)胞	人脯氨suan肽mei(PEPD)試劑盒ELISA
HKC (人腎小管上皮細(xì)胞)	人類似cDNA順序BC027382試劑盒ELISA
HLF-a (人肺細(xì)胞)	人單純皰疹病毒Ⅰ型(HSVⅠ)抗體(IgM)ELISA檢測試劑盒
HuT 78 (人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)	人T細(xì)胞受體(TCR)檢測試劑盒
HuTu-80 (人十二脂腸腺癌)	人鼻病毒16 PCR試劑盒
IAR20 (大鼠肝細(xì)胞)	沙眼衣原體PCR檢測試劑盒
IM-9 (人外周血B淋巴細(xì)胞)	轉(zhuǎn)基因植物EPSPS基因PCR檢測試劑盒
INS-1 (大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞)	對蝦桿狀病毒PCR檢測試劑盒
IR983F (大鼠骨髓瘤細(xì)胞)	馬兜鈴探針法PCR鑒定試劑盒
J774A.1 (小鼠單核巨噬細(xì)胞)	禽副粘病毒1型RT-PCR試劑盒
K7M2 wt [K7M2-WT] (小鼠骨肉瘤成骨細(xì)胞)	H5-H7-H9與新城疫病毒（NDV）四重核suan檢測試劑盒
KiMA (人胚腎上皮細(xì)胞)	馬梨形蟲病(Piroplasmosis)雙重核suan檢測試劑盒
KATO III [KATO 3] (人胃癌細(xì)胞)	大鼠嗅球神經(jīng)元細(xì)胞馬動脈炎病毒(EAV)PCR檢測試劑盒(熒光-PCR法)
KP-N-NS (人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞(腦轉(zhuǎn)移))	禽痘病毒PCR試劑盒
L Wnt-3A (小鼠皮下結(jié)締組織細(xì)胞)	傳染性胸膜肺炎放線桿菌(APP)核suan檢測試劑盒