小鼠小腸Cajal間質細胞

2.組織來源：小腸組織

3.產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

4.細胞簡介：

小鼠小腸Cajal間質細胞分離自小腸組織；小腸位于腹中，上端接幽門與胃相通，下端通過闌門與大腸相連，是食物消化吸收的主要場所。小腸盤曲于腹腔內，上連胃幽門，下接盲腸，分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內消化是至關重要的，因為食物經過小腸內胰液、膽汁和小腸液的化學性消化及小腸運動的機械性消化后，基本上完成了消化過程，同時營養物質被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構成。其結構特點是管壁有環形皺襞，粘膜有許多絨毛，絨毛根部的上皮下陷至固有層，形成管狀的腸腺，其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關系密切；構成腸腺的細胞有柱狀細胞、杯狀細胞、潘氏細胞和未分化細胞。柱狀細胞和內分泌細胞與絨毛上皮相似，接近絨毛的柱狀細胞與吸收細胞相似，絨毛深部的柱狀細胞微絨毛少而短，不形成紋狀緣。Cajal間質細胞（ICC）是一類主要分布于胃腸道的間質細胞，是胃腸道的起搏細胞和信號傳導細胞，與肌細胞以及末梢神經元有著緊密的關系，具有激發和促進胃腸蠕動的作用。借助于電子顯微鏡技術，清楚觀察到了ICC位置分布和內部精細結構；應用免疫熒光等生化技術，發現了其特殊表達的c-kit蛋白；利用電生理技術，得知多種胃腸動力障礙疾病也與其異常有關。多年來，學者逐漸在胃腸道、膽道、膀胱、子宮等部位發現了ICC的蹤跡，并試圖闡述其與某些疾病的發生機制。

5.方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠小腸Cajal間質細胞采用膠原酶消化法結合組織貼塊法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

6.質量檢測：

公司實驗室分離的小鼠小腸Cajal間質細胞經c-kit免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

7.培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%yi蛋白酶

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

操作步驟：

步驟1：從冰箱拿出無血清非程序凍存液，待用

步驟2：離心收集對數生長期的細胞（貼壁細胞消化下來離心，懸浮細胞直接離心，轉速1200rpm或250g，時間3min）

步驟3：棄上清，加入適量無血清非程序凍存液，重懸細胞

步驟4：按照1~1.5mL/管的量分裝到凍存管中，擰緊管蓋，做好標記

步驟5：將凍存管直接移入-80℃冰箱中，24h后轉移至液氮長期保存

在沒有凍存盒或者非程序凍存液時，可以選擇手動梯度降溫。但手動梯度降溫不適用于所有細胞，且效果不穩定，同樣需要先做凍存測試。

注意事項：

1、收到細胞后，若發現干冰已揮發干凈、凍存管瓶蓋脫落、破損及細胞有污染，請立即與我們聯系。

2、收到細胞先不開瓶蓋，瓶身擦拭酒精后放在培養箱靜置2-4小時（視細胞密度而定）穩定細胞狀態。接著在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況，并對細胞進行不同倍數拍照（建議收細胞時就整體外觀拍一張照片，觀察培養基的顏色和是否有漏液情況，隨后在顯微鏡下拍下細胞狀態，100*，200*各一張），觀察記錄細胞在運輸過程中是否有污染情況。作為我方進行銷售依據。

3、由于細胞狀態受環境、操作和運輸等多方面因素影響，故本公司只保證客戶收到細胞后一周內的細胞狀態，故客戶需要售后時需出示收到細胞的時間證明及客戶提供收貨時間和發現問題后客服人員溝通的時間證明，期間間隔時間不能大于7天。

4、所有動物細胞均視為有潛在的生物危害性，必須在二級生物安全臺內操作，并請注意防護，所有廢液及接觸過此細胞的器皿需要滅菌后方能丟棄。

細胞處理：

1）凍存細胞的復蘇：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入到含4-6mL培養基的離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心3-5min，棄去上清液，培養基重懸細胞。然后將細胞懸液加入含6-8ml培養基的培養瓶（或皿）中37℃培養過夜。第二天顯微鏡下觀察細胞生長情況和細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達70%-90%，即可進行傳代培養。該細胞為懸浮和輕微的貼壁細胞，傳代可以參考以下方法：

1、收集：將培養瓶中的懸浮的細胞收集到離心管中。用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。由于細胞貼壁不牢PBS潤洗后細胞會脫落所以PBS也要回收到離心管中。

2、加入0.25％（w / v）0.53 mM EDTA于培養瓶中（T25瓶1-2mL，T75瓶2-3mL）置于37℃培養箱中消化1-2分鐘（難消化的細胞可以適當延長消化時間），然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養瓶后加入3-4ml含10%FBS的培養基來終止消化。

3、將收集到的懸浮細胞、pbs清洗液中的細胞和消化下來的貼壁細胞以1000rpml離心5min，棄去上清，補加1-2mL培養液后重懸混勻后將細胞懸液按1：2的比例分到新T25瓶中，添加6-8ml按照說明書要求配置的新的培養基以保持細胞的生長活力，后續傳代根據實際情況按1:2~1:5的比例進行。

3）細胞凍存:收到細胞后建議在培養前3代時凍存一批細胞種子以備后續實驗使用。下面T25瓶為例：

1、細胞凍存時按照細胞傳代的過程收集消化好的細胞到離心管中，可使用血球計數板計數，來決定細胞的凍存密度。一般細胞的推薦凍存密度為1×10?~1×10?個活細胞/ml.

2、1000rpm離心3-5min，去掉上清。用配制好的細胞凍存液重懸細胞 ，按每1ml凍存液含1×10?~1×10?個活細胞/ml分配到一個凍存管中將細胞分配到凍存管中，標注好名稱、代數、日期等信息。

3、將要凍存的細胞置于程序降溫盒中，-80度冰箱中過夜，之后轉入液氮容器中儲存。同時記錄好凍存管在液氮容器中的位置以便后續查閱和使用。

公司正在出售的產品：

大鼠腸神經嵴干細胞

BV2 (小鼠小膠質細胞)

Acc-3 (人涎腺腺樣囊性癌細胞)

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BEAS-2B(人正常肺上皮細胞)

MHCC97-L (人低轉移肝癌細胞)

MEG-01 (人成巨核細胞白血病細胞)

H9 (人T淋巴細胞系)

Bewo (人絨毛膜腫瘤細胞)

RK-13 (兔腎細胞系)

104C1 (轉化的豚鼠胎體細胞)

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C6/36 [Clone C6/36] (蚊子細胞)

AN3 CA (人子宮內膜腺癌細胞)

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人肺炎支原體抗體(MP-Ab)試劑盒ELISA

人蛋白磷suanmei1調控/抑制因子亞基1A(PPP1R1A)試劑盒elisa

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人Z-DNA結合蛋白1(ZBP1)檢測試劑盒

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麩質Gluten基因PCR檢測試劑盒

馬媾疫錐蟲PCR試劑盒

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禽呼腸孤病毒(ARV)核suan檢測試劑盒

小鼠小腸Cajal間質細胞馬鈴薯Cry3c基因PCR檢測試劑盒

馬媾疫錐蟲PCR檢測試劑盒

禽傳染性喉氣管炎病毒(AiLTV)核suan檢測試劑盒

豬輪狀病毒A組(PRV-A)核suan檢測試劑盒