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型號 | CP914009 | 保存 | -20℃避光 |
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用途 | 僅供科研實驗 |
鰤魚諾卡氏菌核酸檢測試劑盒(恒溫熒光法)
本產品僅供科學實驗研究使用! 不能用于臨床或動物診斷!
英文名稱:
型號:CP914009
規格:50T
分類:恒溫熒光法
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光。
有效期:一年
規格及成分:
PCR檢測試劑盒流程示意圖:
【結果分析條件設定】
u 基線(Baseline)設定:應選擇該次實驗指數擴增前所有樣本熒光信號比較穩定的一段區域(所有樣本熒光信號無較大波動),起始點(Start)應避開熒光采集起始階段的信號波動,終止點(End)應比早出現指數擴增的樣本Ct值減少1~3個循環,建議基線設為6~15。
u 閾值(Threshold)設定:將閾值線設定在剛好超過正常陰性質控品擴增曲線的高點。
【質控標準】
1. 陰性質控品的檢測結果應為陰性,無指數擴增期,Ct=40或無Ct;
2. 陽性質控品的檢測結果應為陽性,有明顯的指數擴增期,Ct值應小于等于35;
3. 以上要求需在一次實驗中同時滿足,否則該次實驗視為無效。
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實驗操作:
1. 模板制備(樣本制備區)
建議使用配套水生動物病害基因組 DNA/RNA 提取試劑盒系列產品,具體過程詳見產品說明書。
2.添加模板(模板添加區,放置于冰盒中進行)
請于-20℃條件下保存,有效期 12 個月
取出所需測試數的已含有反應液 A-TSV-I 的 PCR 管,將試劑解凍,離心 30 秒,在管蓋上標記管名(陰性對照管 NG、樣品 XX、陽性對照管 PG)。打開管蓋向各管管底分別加入 0.8μL B-I 及 0.2μL R-I,蓋上陰性對照管管蓋,其他各管分別沿管壁加入 2μL 模板,順序為待測樣品模板、PG-TSV-I,依次蓋好各管管蓋,離心 30 秒,立即進行擴增反應。
3. 擴增反應(擴增及產物分析區)
①恒溫儀器 63℃條件下反應 60 min。待儀器升溫至 63℃后,新建程序,設置實驗名稱及反應時間,將步驟 2中離心后的 PCR 反應管放入恒溫熒光分子檢測儀,點擊開始檢測。
②若使用熒光定量 PCR 儀,則熒光基團選擇 FAM,淬滅基團選擇 None,將 63℃ 15 s,63℃ 45 s 作為一個循環,于 63℃ 45 s 處收集熒光信號,60 個循環。
其他儀器請參照儀器說明書進行設置。
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