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大鼠188基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白

參  考  價(jià):1259 - 3959 /盒
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英文名稱(chēng) Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12) 物種 Rattus norvegicus (Rat,大鼠)
型號(hào) CS-D187 性狀 凍干粉
大鼠188基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白公司正在出售的產(chǎn)品:大鼠胰島su樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白4(IGFBP-4)試劑盒 ELISA奮森疏螺旋體PCR試劑盒大鼠胰島su原(PI)ELISA試劑盒奮森疏螺旋體PCR試劑盒大鼠胰島su自身抗體(IAA) ELISA檢測(cè)試劑盒糞產(chǎn)堿桿菌PCR試劑盒大鼠胰島細(xì)胞抗體(ICA)試劑盒 ELISA糞產(chǎn)堿桿菌PCR試劑盒

大鼠188基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白

大鼠188基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白

種屬

(Rat,大鼠)

型號(hào)

CS-D187

純度

> 95%

性狀

凍干粉

用途

僅供科研實(shí)驗(yàn)

規(guī)格

10μg50μg200μg1mg5mg


大鼠188基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白

產(chǎn)品名稱(chēng):中文名稱(chēng)188基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白

英文名稱(chēng):Recombinant Matrix Metalloproteinase 12 (MMP12)

MME; HME; ME; Macrophage Metalloelastase; Macrophage Elastase

型號(hào):CS-D187

酶與激酶

腫瘤免疫

感染免疫

物種:Rattus norvegicus (Rat,大鼠)

來(lái)源:原核表達(dá)

宿主E.coli

內(nèi)毒素水平:<1.0EU/μg(LAL法測(cè)定)

亞細(xì)胞定位::n/a

預(yù)測(cè)分子量:10.5kDa

實(shí)際分子量:-(差異分析請(qǐng)參閱說(shuō)明書(shū))

片段與標(biāo)簽:Val20~Arg99 (Accession # Q63341) with

緩沖液成份:磷酸鹽緩沖液(pH7.4,含有 0.01% SKL, 1mM DTT, 5% Trehalose和Proclin300.)

性狀:凍干粉

純度:> 95%

等電點(diǎn):-

應(yīng)用:Positive Control; Immunogen; SDS-PAGE; WB.

規(guī)格:10μg50μg200μg1mg5mg

 


大鼠188基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白大鼠188基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白

1、組織蛋白提取

1)所需器材:制冰機(jī)、標(biāo)記筆、兩套1.5ml EP管(高溫高壓處理)、一個(gè)大冰盒、一個(gè)1.5ml EP管盒、手套、眼科剪(高溫高壓處理)、新鮮組織或保存于-80℃冰箱組織、保存于4℃冰箱的PBS(高溫高壓處理)、移液槍、吸頭(高溫高壓處理)、兩套研磨棒(高溫高壓處理)、掌上離心機(jī)、濾紙、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟(PMSF,一種蛋白酶抑制劑,劇毒)、離心機(jī)、燒杯、2×SDS凝膠上樣緩沖液、二硫蘇糖醇(DTT)、震蕩器、泡沫板。

大鼠188基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白

a.制冰機(jī)制冰;

b.標(biāo)記筆將兩套EP管做好標(biāo)記;

c.將大冰盒、EP管盒裝上冰,一套標(biāo)記筆做好標(biāo)記的EP管放置于大冰盒中,另一套標(biāo)記筆做好標(biāo)記的EP管放置于EP管盒中,戴好手套,帶上EP管盒、眼科剪剪取黃豆大小(約100mg)新鮮組織或保存于-80℃冰箱組織;

d.取出保存于4℃冰箱的PBS,往EP管中滴加1ml PBS,眼科剪剪碎組織(動(dòng)作快),掌上離心,棄上清,再往EP管中滴加1ml PBS,研磨棒研磨,3000轉(zhuǎn)離心10分鐘,棄上清,濾紙盡可能吸干管口殘留液體,估算EP管中沉淀物體積,以上步驟盡可能在冰上操作;

e.從4℃冰箱取出三去污裂解液,-20℃冰箱中取出PMSF置于大冰盒中,往EP管中滴加沉淀物3-5倍體積的三去污裂解液(一般為5倍),再加入PMSF(二者比例為94:6),研磨棒研磨(冰上充分裂解20-30分鐘),以上步驟均需在進(jìn)行;

f.離心機(jī)預(yù)冷,將充分裂解后的組織液4 ℃、10000轉(zhuǎn)離心10分鐘;

g.將燒杯用自來(lái)水洗凈,倒入單蒸水,電爐上煮沸;

h.備好2×SDS凝膠加樣緩沖液(存放于常溫),取出保存于-20℃冰箱的DTT,置于大冰盒中,將離心后的上清液用移液槍定量吸至另一套EP管中(勿吸取下層沉淀物),按上清液:2×SDS:DTT =1: 0.8:0.2加入2×SDS 及DTT,掌上離心,然后小心將EP管插入泡沫板,投入已煮沸的燒杯中煮6-8分鐘(電爐功率不要調(diào)太大,以免管蓋爆開(kāi));

i. 將泡沫板用鑷子取出,置大冰盒中冷卻10分鐘,掌上離心,再放入-20℃冰箱保存?zhèn)溆谩?/span>

注意:裂解液也可酌情選用單去污裂解液或細(xì)胞裂解液等。

2、貼壁細(xì)胞蛋白提取(細(xì)胞蛋白含量一般約為1x10-9mg/細(xì)胞)

1)所需器材:制冰機(jī)、細(xì)胞刮刀、標(biāo)記筆、兩套1.5ml EP管(高溫高壓處理)、兩個(gè)大冰盒、手套、長(zhǎng)滿細(xì)胞的培養(yǎng)瓶、保存于4℃冰箱的PBS、三去污裂解液、苯甲基磺酸氟(PMSF,一種蛋白酶抑制劑,劇毒)、移液槍、吸頭(高溫高壓處理)、濾紙、離心機(jī)、燒杯、4×SDS凝膠上樣緩沖液、二硫蘇糖醇(DTT)、泡沫板。

大鼠188基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白

大鼠188基質(zhì)金屬蛋白酶12(MMP12)重組蛋白


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