免疫熒光試劑盒(山羊源一抗)(DyLight488)

商品介紹：

本試劑盒采用SABC系統，是專為免疫化學而設計的，用以顯示組織或細胞中的抗原分布。DyLight是一種近年來被廣泛應用的新型熒光染料，由于具有很好的光譜寬度、更強的熒光強度，更高的光學耐受性（抗淬滅性）和特異性，對pH不敏感、分子較小而滲透性更好的優勢，標記的抗體比Cy2和FITC標記的更亮，但背景更低；DyLight 488-SABC，將鏈霉親和素—生物su引入熒光系統，能進一步提高敏感性及降低背景。DyLight 488大吸收峰 493nm；大發射峰518nm。呈黃綠色。

商品屬性：

保存條件：4℃可保存一年，應避免冷凍。

石蠟片染色步驟：

1. 切片脫蠟至水。

2. 根據需要選擇抗原修復方式及強度。可熱修復、酶修復或不修復。

3. 封閉：滴加稀釋的正常兔血清封閉液(稀釋比 1:10),室溫 20 分鐘。甩干，勿洗。

4. 滴加適當稀釋的一抗(山羊IgG)，37℃孵育 1~2 小時或4℃過夜。PBS洗5分鐘×3次。

5. 滴加稀釋的生物su標記兔抗山羊IgG(參考效價1:100),37℃孵育30分鐘。PBS洗5分鐘×3次。

6. 滴加稀釋的 SABC- DyLight 488(參考效價 1:200-800)，37℃孵育30分鐘。PBS洗5分鐘×4 次。

7. 水溶性封片劑(ZN2946)或抗熒光衰減封片劑(ZN1974)封片。熒光顯微鏡觀察

步驟和注意事項：?

準備實驗環境：?確保實驗區域清潔，?使用酒精清潔計數板和蓋玻片，?然后用吸水紙輕輕擦干。?

細胞培養：?

準備試管或培養皿、?細胞培養基和待培養的細胞。?

取出保存于低溫下的細胞苗，?并加入培養基中，?搖晃混合均勻。?

用移液管將細胞培養基和細胞種植在試管或培養皿中。?

將試管或培養皿放置于恒溫培養箱中，?定期更換培養液。?

細胞凍存與復蘇：?

細胞系的凍存是將生長較好的傳代細胞懸浮在加有冷凍保護劑的溶液中，?以一定的冷凍速率降至零下某一溫度，?并在此溫度下對其長期保存的過程。?

復蘇則是將凍存的細胞系恢復到常溫的過程，?原則是“慢凍快融"，?以較大限度地保存細胞活力。?

細胞計數：?

制備細胞懸液，?使用消化單層培養細胞或收集懸浮培養細胞，?制成單個細胞懸液。?

在顯微鏡下，?用10×物鏡觀察計數板四角大方格中的細胞數，?細胞壓中線時，?只計左側和上方者，?不計右側和下方者。?

熒光顯微鏡使用：?

使用熒光染料對細胞進行染色，?并觀察細胞所發出的熒光信號，?以研究細胞結構和功能。?

聚合酶鏈反應（?PCR）?：?

準備PCR反應所需的DNA模板、?引物、?聚合酶和核苷酸。?

按照PCR反應液配制表制備反應液。?

在反應器中加入反應液，?開始PCR反應。?

PCR反應的成功與否，?可以通過電泳、?測序等方法進一步確認。?

轉染：?

準備轉染所需的載體DNA和細胞。?

制備轉染試劑，?將DNA載體溶解于轉染試劑中，?與細胞混合均勻。?

處理轉染細胞，?并進行下一步實驗。?

在操作過程中，?應注意實驗室安全規范，?避免隨意丟棄垃圾，?及時登記購買耗材或試劑，?保持實驗環境的清潔和安全

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