ELISA實(shí)驗(yàn)中容易出現(xiàn)的問(wèn)題及解決方法
我們常說(shuō)到的ELISA試劑盒是酶聯(lián)接免疫吸附劑測(cè)定的簡(jiǎn)稱(chēng),它是繼免疫熒光和放射免疫技術(shù)之后發(fā)展起來(lái)的一種免疫酶技術(shù)。elisa技術(shù)自70年代初問(wèn)世以來(lái),發(fā)展十分迅速,到目前為止已經(jīng)被廣泛用于生物學(xué)和醫(yī)學(xué)科學(xué)的許多領(lǐng)域之中。
在試驗(yàn)中可能會(huì)出現(xiàn)所有孔都沒(méi)有顯色,那么原因就有可能是微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。ELISA試劑盒也可能是用錯(cuò)試劑。您在想想是不是在操作中忘記加酶或抗體。
所有孔都沒(méi)有顯色的問(wèn)題解決方法:
1、檢查洗板器械,比如洗板機(jī)管道是否堵塞、洗液是否用完。
2、在加樣前,要看清瓶簽。
3、嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)操作步驟進(jìn)行實(shí)驗(yàn),確保每步都到位。
您有沒(méi)有遇見(jiàn)過(guò)所有孔顯色偏低的現(xiàn)象?那么氣原因就有可能是微孔加入抗體后,洗板不*,微孔中存在游離的抗體。ELISA試劑盒或者是洗板不干凈。抗體污染了酶結(jié)合物等其它試劑。溫度沒(méi)達(dá)到要求也會(huì)受到相應(yīng)的實(shí)驗(yàn)影響。還有可能是每孔加入的試劑量低于說(shuō)明書(shū)要求量。
所有孔顯色偏低的問(wèn)題解決辦法:
(1)手工加蒸餾水洗板時(shí),要避免吸頭接觸微孔,常更換新的蒸餾水。
(2)洗板時(shí)要確保每孔都注滿(mǎn)蒸餾水(約400ul),且至少洗板五次。
(3)嚴(yán)格按說(shuō)明書(shū)要求操作,每次取樣要更換吸頭。
(4)控制孵育溫度在25℃。
(5)加樣器吸頭安放牢固避免吸樣不足,加樣時(shí)務(wù)必將吸頭內(nèi)液體打盡。
Anti-Phospho-HP1 gamma (Ser83) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化染色質(zhì)相關(guān)蛋白1-γ抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-PI3K/P85 alpha/FITC 熒光素標(biāo)記磷脂酰肌醇激酶抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-PI3K p85 (Tyr458)/p55 (Tyr199) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化磷脂酰肌醇激酶抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-PI3 Kinase p110 delta/FITC 熒光素標(biāo)記磷脂酰肌醇激酶催化亞單位D抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-PIBF/FITC 熒光素標(biāo)記孕激素誘導(dǎo)阻斷因子抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-PIM1/FITC 熒光素標(biāo)記前病毒整合位點(diǎn)蛋白1抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-PIM1(Tyr218) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化前病毒整合位點(diǎn)蛋白1抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Pin1/FITC 熒光素標(biāo)記肽基脯氨酞順?lè)串悩?gòu)酶Pinl抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-Pin1 (Ser16)/FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化肽基脯氨酞順?lè)串悩?gòu)酶Pinl抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-PNK1/PNKP/FITC 熒光素標(biāo)記多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-Phospho-PNK1 (Ser114/Thr118) /FITC 熒光素標(biāo)記磷酸化多聚合苷酸激酶3磷酸化酶抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml
Anti-PIRH2/FITC 熒光素標(biāo)記泛素連接酶抗體IgG Multi-class antibodies 規(guī)格: 0.2ml