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液相色譜定量分析原理
液相色譜定量分析原理
液相色譜定量分析原理
在定性的基礎(chǔ)上定量,需有純物質(zhì)作為標(biāo)準(zhǔn)物
液相色譜定量是相對定量的方法:即由已知量的純標(biāo)樣推算混合物中被測物的量
定量的依據(jù)是:
被測組分的量與響應(yīng)值(峰高或峰面積)成正比
由已知量的標(biāo)樣可求得定量校正因子
定量校正因子:是定量計算公式中的比例常數(shù),其物理意義是單位響應(yīng)值(峰面積)所代表的被測組分的量
測定未知組分的響應(yīng)值,通過定量校正因子即可求得其含量
液相色譜定量分析的步驟
1、選擇一個適合定量分析的色譜方法：
確認(rèn)被檢測組分峰,并達到分離度(R)大于1.5
確定被測組分色譜峰的一致性(純度)
確定方法的檢測限及定量限;靈敏度及線性范圍
2、用不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)樣品建立校正曲線
3、考查定量方法的準(zhǔn)確度及精密度
4、用相應(yīng)的色譜管理軟件實施樣品采集,數(shù)據(jù)處理及報告結(jié)果
確認(rèn)定量峰的一致性
確認(rèn)色譜峰的一致性(純度)
保證每個色譜峰下只有一個被測的組份
檢查是否有共流出的物質(zhì)（雜質(zhì)）干擾
色譜峰一致性(純度)確認(rèn)的方法
用光電二極管矩陣(PDA)檢測器比較光譜圖
峰純度鑒定
2996的純度角理論
常用的定量方法
標(biāo)準(zhǔn)曲線法,分為外標(biāo)法和內(nèi)標(biāo)法:
外標(biāo)法：在液相色譜中用得*多
內(nèi)標(biāo)法：準(zhǔn)確，但是麻煩，在標(biāo)準(zhǔn)方法中用得*多