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技術文章

食品接觸面的微生物檢驗

閱讀:1099發布時間:2011-4-1

1 原理
食品接觸面分為人員手、設備、器具等食品直接接觸,其表面存在有微生物,為更好控制微生物生長繁殖,以大腸菌群為主要檢測指標,檢測結果應基本呈陰性(其中人員手需做菌落總數檢測)。
2 檢驗材料 
乳糖膽鹽發酵培養基、EMB、乳糖復發酵培養基、大腸菌群檢測紙片、無菌棉球、無菌水、酒精棉球、酒精燈、鑷子 
3 檢驗方法
3.1 人員手檢驗(發酵法)
3.1.1 樣品采集
被檢人雙手五指并攏,用一浸濕生理鹽水的棉簽在右手指曲面,從指尖到指端來回涂擦10次,然后剪去手接觸部分棉棒,將棉簽放入含10ml滅菌生理鹽水的采樣管內。
3.1.2 細菌菌落總數的檢測
將已采集的樣品在6h內送實驗室,每支采樣管充分混勻后取1ml樣液,放入滅菌平皿內,傾注營養瓊脂培養基,每個樣品平行接種兩塊平皿,置36±1℃培養48小時,計數平板上細菌菌落數。
Y=A*10(Y為工人手表面細菌菌落總數,cfu/只手;A為平板上平均細菌菌落數)
3.1.3 大腸菌群的檢測
每支采樣管充分混勻后取1ml樣液,分別放入10ml乳糖膽鹽發酵管中,每個樣品平行接種3管,置36±1℃培養24小時。如所有發酵管都不產氣,則可報告為大腸菌群陰性;如有產氣者,則按下列程序進行。
3.1.4 分離培養:將產氣的發酵管用接種環分別以劃線法轉接于伊紅美蘭瓊脂平板上,置36±1℃溫箱內,培養18~24小時,取出觀察菌落形態。
3.1.5 證實試驗:在每個平板上,挑取可疑菌落(紫黑色或淡紫紅色,有或略有或沒有金屬光澤的菌落)1~2個進行革蘭氏染色,同時接種乳糖發酵管,置36±1℃培養24±2小時進行復發酵試驗,觀察產氣情況。凡乳糖管產氣、革蘭氏染色為陰性的芽孢桿菌即可報告為大腸菌群陽性。
3.2 設備、器具等的檢驗(紙片法)
3.2.1 將面積為25cm2的大腸菌群檢測紙片用無菌水浸濕后立即貼于被檢物表面,每份檢樣貼2張,30s后取下,置于無菌塑料袋中。
3.2.2 將已采樣的紙片置37℃培養16-18小時,觀察紙片顏色變化情況。
3.2.3 若紙片保持藍紫色不變為大腸菌群陰性,紙片變黃并在黃色背景上呈現紅色斑點或片狀紅暈為陽性。
4 報告
人員手菌落總數為cfu/只手,大腸菌群為未檢出或檢出;設備、器具等大腸菌群為未檢出或檢出。

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