日韩午夜在线观看,色偷偷伊人,免费一级毛片不卡不收费,日韩午夜在线视频不卡片

行業產品

  • 行業產品

青島海博生物技術有限公司


當前位置:青島海博生物技術有限公司>技術文章>食品和水中腸球菌檢驗方法第2部分:濾膜法
技術文章

食品和水中腸球菌檢驗方法第2部分:濾膜法

閱讀:1698發布時間:2011-3-30

1范圍
SN /T 1933 的本部分規定了水和液體飲料中腸球菌檢驗濾膜法。
本部分適用于生活用水、生產加工用水、廢水及茶飲料、碳酸飲料等液體飲料中腸球菌的檢驗。
2 規范性引用文件
下列文件中的條款通過SN / T 1933 的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文件,其隨后所有的修改單(不包括勘誤的內容)或修訂版均不適用于本部分,然而,鼓勵根據本部分達成協議的各方研究是否可使用這些文件的版本。凡是不注日期的引用文件,其版本適用于本部分。
GB / T 6682 分析實驗室用水規格和實驗方法
SN / T 0330出口食品中微生物學檢驗通則
3 方法提要
一定數量液體樣品或樣品稀釋液通過濾膜時,細菌被截留在濾膜上。將濾膜置于選擇性培養基上培養后,腸球菌菌落呈現特定顏色。經過腸球菌菌落確證實驗后,計數并計算濾膜上陽性腸球菌菌落數,即可檢驗出樣品中腸球菌數目。
4 術語、定義和縮略語
SN / T 1933 . 1 確立的術語、定義和縮略語適用于SN / T 1933 的本部分。
5 設備和材料
5 .1電子天平:感量為0.001g 。
5 . 2 恒溫培養箱:41℃士0 .5℃,35℃士0.5℃,45℃士0.5℃
5 . 3 振蕩器。
5 . 4 移液管:容量1mL ,10mL 。
5 . 5 培養皿:9x50 mm ,直徑90 mm 。
5 . 6 玻璃、耐高溫塑料、陶瓷或不銹鋼過濾器。
5 . 7 抽濾瓶。
5 . 8 真空泵。
5 . 9 濾膜:直徑47mm ,微孔徑0.45um 士0.02um 。
6 培養基和試劑
實驗用水符合GB / T 6682 分析實驗室用水規格和實驗方法的要求。除另有規定外,試劑為分析純。
6.1 mEI 瓊脂(見第A . l 章)。
6 . 2 膽汁七葉苷瓊脂(BEA 瓊脂)(見第A . 2 章)。
6 . 3腦心浸液肉湯(見第A . 3 章)。
6 . 4含6 . 5 % NaCl 腦心浸液肉湯(見第A . 4 章)。
6 . 5腦心浸液瓊脂(見第A . 5 章)。
6 . 6緩沖蛋白胨水(見第A . 6 章)。
7 樣品制備
7 .1抽樣數量及抽樣方法
抽樣數量及抽樣方法按SN / T 0330 進行。
7 . 2 樣品的貯存和運送
采樣后應盡快進行檢驗,冷凍樣品如不能立即進行檢驗,應置于-18 ℃ 保存。應冷藏保存的待檢樣品在運送實驗室過程中應于l ℃ ~ 4 ℃ 保存。樣品采集后8h 之內要完成檢驗。
7 . 3 制樣
7 . 3 . 1 污染程度低的水及液體飲料可以直接進行檢驗。
7 . 3 . 2 污染嚴重的水及液體飲料可吸取25 mL 樣品,加人225 mL 緩沖蛋白胨水中,充分混勻,制成l:10樣品勻液。
7 . 3 . 3 以上樣品制備可根據樣品污染程度及檢驗需要,進一步制成10 倍遞增的樣品稀釋液。
8 檢驗程序
水和液體飲料中腸球菌濾膜法檢驗程序見圖l 。
樣品原液或適當倍數稀釋液
樣品過濾
mEl 瓊脂4l℃ 士0.5℃ 24h 士lh
取帶藍色暈輪的菌落進行確證實驗
↙                 ↙                ↘            ↘
                   革蘭氏陽性球菌     BEA平板生長,  在BHIB中45℃生長    6.5%NaCl的BHIB
                                         水解七葉苷                           中35℃ 生長
腸球菌陽性
菌落計數及計算
報告結果
圖1 食品和水中腸球菌濾膜法的檢驗程序示意圖
9 檢驗步驟與計數
9 .1培養基平板制備
制備mEI 瓊脂培養基(見第A . 1 章)。
9 . 2 樣品量的選擇
根據樣品污染情況,選擇適宜稀釋度的樣液。樣品加樣量在1mL ~100 mL 之間按半對數間距選擇(例如:加樣100ml 、30ml、10ml、3ml),以能在濾膜上生長出20 個~60 個菌落為宜。每個樣品至少選擇三個加樣量進行過濾。
9 . 3 樣品過濾
將滅過菌的過濾裝置連接到抽濾瓶上,用無菌鑷子夾取濾膜,將濾膜放至濾器底部。無菌吸取樣液至濾器內,打開真空泵進行抽濾。當全部樣液通過濾膜后,用20mL~30ml滅菌生理鹽水輕洗濾器邊緣至少兩次。關閉真空泵,打開濾器,用無菌鑷子移取濾膜。
9 . 4 接種與培養
將已濾過樣液的濾膜緊貼在mEI瓊脂表面上,防止濾膜與瓊脂間產生氣泡,如有氣泡產生,重新放置濾膜。倒置平板于41℃ 士0.5℃ 培養24h 士lh 。
9 . 5 菌落形態觀察
腸球菌在mEI 瓊脂平板的濾膜上形成帶有藍色暈輪的菌落。
9 . 6 確證試驗
9 . 6 . 1 用滅菌接種針從濾膜上至少挑取10 個帶有藍色暈輪的菌落(不必考慮菌落本身顏色,只要是帶有藍色暈輪的菌落即可)進行確證試驗。菌落分別接種到BHIB 肉湯和BHIA 斜面,BHIB 肉湯置35℃士0.5℃ 培養24h士lh , BHIA 斜面置35℃士0.5℃ 培養48h士lh 。
9 . 6 . 2 BHIB 肉湯培養24h士lh 后,每管肉湯培養物分別接種到相應BEA 平板、BHIB 肉湯及含6.5%氯化鈉的BHIB 肉湯中。BEA 平板及含6.5%氯化鈉的BHIB 肉湯置35℃士0. 5℃培養48h士lh ; BHIB 肉湯置45℃士0.5℃培養48h士lh,觀察細菌生長情況。
9 . 6 . 3 BHIA 斜面培養48h士lh后,從斜面上挑取菌落作革蘭氏染色。
9 . 6 . 4 革蘭氏染色鏡檢為革蘭氏陽性球菌;在BEA 平板上生長并水解七葉苷(形成黑色或棕色沉淀); BHIB 肉湯中45 ℃ 士0.5 ℃ 生長;并且在含6 . 5 %氯化鈉的BHIB 肉湯中35℃ 士0.5℃生長良好;具有以上特性的典型菌落可確證為腸球菌。
9 . 7 腸球菌的計數
對確證為腸球菌菌落的濾膜進行計數,生長有20 個~60 個腸球菌的濾膜為計數合適范圍。
9 . 8 腸球菌菌數的計算
根據所使用的樣品量,按照式(1),計算每100 mL 樣品中腸球菌菌落數。
腸球菌/100 ml =腸球菌菌落數x100 /[樣品過濾體積(mL)x稀釋倍數]
10 結果報告
腸球菌:CFU/100ml 。
附錄A
(資料性附錄)
培養基
A . 1 mEI 瓊脂
A . 1 . 1 成分
蛋白胨10.0g
氯化鈉15.0g
七葉苷1.0g
放線菌酮0.05g
*0.15g
酵母浸膏30.0g
β-D- 引哚葡糖苷0.75g
瓊脂15.0g
蒸餾水100O.0ml
A . 1 . 2 制法
將以上各成分加熱溶解,121 ℃ 高壓滅菌15min ,在50 ℃ 水浴中冷卻。在5 ml蒸餾水中加0.24g萘啶酮酸,滴加幾滴0 .1 mol/L的氫氧化鈉,配制萘啶酮酸溶液,將此溶液加人mEI瓊脂中。再加人0 . 02g無菌氯化三苯四氮唑(TTC ) ,充分混勻。調節pH 值至7.1 士0.2 。
傾注約4 mL~6mL的mEI瓊脂至9x50 mm 的平板,瓊脂厚度約4mm ~5mm。平板冷藏備用。
A . 2 膽汁七葉苷瓊脂
A . 2 . 1 成分
蛋白胨8.0g
膽汁鹽20.0g
檸檬酸鐵0.5g
七葉苷1.0g
瓊脂15.0g
蒸餾水1000.0ml
A . 2 . 2 制法
將各成分加熱溶解, 121 ℃ 高壓滅菌15 min ,調節pH 值至7 . 1 士0 . 2 。冷至45℃~50 ℃ 傾注平板。
A . 3 腦心浸液肉湯(BHIB )
A . 3 . 1 成分
牛腦浸出粉10.0g
牛心浸出粉9 .0g
胰蛋白胨10.0g
葡萄糖2 .0g
氯化鈉5 . 0g
*2 . 5g
蒸餾水1000.0ml
A . 3 . 2 制法
將各成分加人蒸餾水中,加熱溶解,調節pH 至7 . 4 士0 . 2 ,分裝,121 ℃ 高壓滅菌15 min 。
A . 4 含6 . 5 %氯化鈉(NaCl)腦心浸液肉湯
A . 4 . 1 成分
除加人氯化鈉(NaCl) ,其余成分與BHIB 肉湯相同。
A . 4 . 2 制法
每升BHIB 肉湯中加60.0g 氯化鈉(NaCl),其余制法與BHIB 肉湯相同。
A . 5 腦心浸液瓊脂
A . 5 . 1 成分
除每升BHIB 肉湯加15 .0g 瓊脂,其余成分與BHIB 肉湯相同。
A . 5 . 2 制法
稱取52g BHIA 溶于1000 mL 蒸餾水中,加熱溶解,每管分裝10 mL , 121 ℃ 高壓滅菌15min ,制備成斜面,調節pH 至7.4士0.2 。
A . 6 緩沖蛋白胨水
A . 6 . 1 成分
蛋白胨10 . 0g
氯化鈉5 . 0g
*9 . 0g
磷酸二氫鉀1 . 5g
蒸餾水1000.0ml
A . 6 .2 制法
按上述成分配好后,調節pH 至7.2,每瓶分裝225 ml , 121 ℃ 高壓滅菌15min 。

環保在線 設計制作,未經允許翻錄必究 .? ? ? Copyright(C)?2021 http://www.kindlingtouch.com,All rights reserved.

以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,環保在線對此不承擔任何保證責任。 溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
主站蜘蛛池模板: 上栗县| 贵溪市| 彝良县| 金湖县| 牡丹江市| 海门市| 上饶县| 文登市| 万年县| 南漳县| 富裕县| 屯留县| 许昌市| 元朗区| 滕州市| 庄浪县| 湄潭县| 进贤县| 新龙县| 桦川县| 抚松县| 东海县| 阜康市| 炉霍县| 老河口市| 涿州市| 城步| 定兴县| 潜山县| 阿克陶县| 保定市| 衡东县| 湖州市| 分宜县| 亚东县| 含山县| 高尔夫| 富锦市| 腾冲县| 西盟| 康平县|