人肺腺癌細胞

GLC-82

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除病毒外的所有生物，都由細胞構(gòu)成。自然界中既有單細胞生物，也有多細胞生物。細胞是生物體基本的結(jié)構(gòu)和功能單位。細胞是生物界中，*一部分。
　　細胞是生命的基本單位，細胞的特殊性決定了個體的特殊性，因此，對細胞的深入研究是揭開生命奧秘、改造生命和征服疾病的關(guān)鍵。細胞生物學已經(jīng)成為當代生物科學中發(fā)展zui快的一門*學科，是生物、農(nóng)學、醫(yī)學、畜牧、水產(chǎn)和許多生物相關(guān)專業(yè)的一門必修課程。50年代以來諾貝爾生理與醫(yī)學獎大都授予了從事細胞生物學研究的科學家。
傳代培養(yǎng)中的細胞傳代培養(yǎng)（subculture），當原代培養(yǎng)成功以后，隨著培養(yǎng)時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面也會因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長或發(fā)生中毒。此時就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內(nèi)，再進行培養(yǎng)。這個過程就稱為傳代（passage）或者再培養(yǎng)（subculture）。對單層培養(yǎng)而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段.
基本解釋：
　　1. 微小的通常是用顯微鏡才能看到的由半透膜與外界分開的原生質(zhì)團
　　2. 現(xiàn)又可比喻事物的基本構(gòu)成部分
詳細解釋:
　　生物學名詞。構(gòu)成生物體的基本單位。體形極微，在顯微鏡下始能窺見。形狀多種多樣。主要由細胞核與細胞質(zhì)構(gòu)成，表面有薄膜。動植物細胞結(jié)構(gòu)大致相同。植物細胞質(zhì)膜外有細胞壁，細胞壁中常有質(zhì)體，動物細胞質(zhì)中常有中心體，而高等植物細胞中則無。細胞有運動、營養(yǎng)和繁殖等機能。
傳代培養(yǎng)中的細胞傳代培養(yǎng)（subculture），當原代培養(yǎng)成功以后，隨著培養(yǎng)時間的延長和細胞不斷分裂，一則細胞之間相互接觸而發(fā)生接觸性抑制，生長速度減慢甚至停止；另一方面也會因營養(yǎng)物不足和代謝物積累而不利于生長或發(fā)生中毒。此時就需要將培養(yǎng)物分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內(nèi)，再進行培養(yǎng)。這個過程就稱為傳代（passage）或者再培養(yǎng)（subculture）。對單層培養(yǎng)而言，80%匯合或剛匯合的細胞是較理想的傳代階段.
　　實驗步驟
　　1．人無菌室之前用肥皂洗手，用75％酒精擦拭消毒雙手。
　　2．倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液置37℃下預(yù)熱。
　　3．超凈臺臺面應(yīng)整潔，用0.1％新潔爾滅溶液擦凈。
　　4．打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右，關(guān)閉超凈臺的紫外燈，打開抽風機清潔空氣，除去臭氧。
　　5．點燃酒精燈；取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管；安上橡皮頭；過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內(nèi)。
　　6．將培養(yǎng)用液瓶口用75％酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。
　　7．倒掉培養(yǎng)細胞的舊培養(yǎng)基。酌情可用2—3mLHanks液洗去殘留的舊培養(yǎng)基，或用少量胰酶涮洗一下。
　　8．每個大培養(yǎng)瓶加入1mL胰酶，小瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察，當細胞收回突起變圓時立即翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中。
　　9．加入少量的含血清的新鮮培養(yǎng)基，反復(fù)吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據(jù)分傳瓶數(shù)補加一定量的含血清的新鮮培養(yǎng)基（7～10mL／大瓶，3～5mL／小瓶）制成細胞懸液，然后分裝到新培養(yǎng)瓶中。蓋上瓶蓋，適度擰緊后再稍回轉(zhuǎn)，以利于CO2氣體的進入，將培養(yǎng)瓶放回CO2培養(yǎng)箱。
　　10．對懸浮培養(yǎng)細胞，步驟7-9不做。可將細胞懸液進行離心去除舊培養(yǎng)基上清，加入新鮮培養(yǎng)基，然后分裝到各瓶中。