人十二脂腸腺癌

HuTu-80

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　　實驗步驟
　　1．人無菌室之前用肥皂洗手，用75％酒精擦拭消毒雙手。
　　2．倒置顯微鏡下觀察細胞形態，確定細胞是否需要傳代及細胞需要稀釋的倍數。將培養用液置37℃下預熱。
　　3．超凈臺臺面應整潔，用0.1％新潔爾滅溶液擦凈。
　　4．打開超凈臺的紫外燈照射臺面20min左右，關閉超凈臺的紫外燈，打開抽風機清潔空氣，除去臭氧。
　　5．點燃酒精燈；取出無菌試管，巴士德吸管和刻度吸管；安上橡皮頭；過酒精燈火焰略燒后插在無菌試管內。
　　6．將培養用液瓶口用75％酒精消毒，過酒精燈火焰后斜置于酒精燈旁的架子上。
　　7．倒掉培養細胞的舊培養基。酌情可用2—3mLHanks液洗去殘留的舊培養基，或用少量胰酶涮洗一下。
　　8．每個大培養瓶加入1mL胰酶，小瓶用量酌減，蓋好瓶蓋后在倒置顯微鏡下觀察，當細胞收回突起變圓時立即翻轉培養瓶，使細胞脫離胰酶，然后將胰酶倒掉。注意勿使細胞提早脫落入消化液中。
　　9．加入少量的含血清的新鮮培養基，反復吹打消化好的細胞使其脫壁并分散，再根據分傳瓶數補加一定量的含血清的新鮮培養基（7～10mL／大瓶，3～5mL／小瓶）制成細胞懸液，然后分裝到新培養瓶中。蓋上瓶蓋，適度擰緊后再稍回轉，以利于CO2氣體的進入，將培養瓶放回CO2培養箱。
　　10．對懸浮培養細胞，步驟7-9不做?？蓪⒓毎麘乙哼M行離心去除舊培養基上清，加入新鮮培養基，然后分裝到各瓶中。
除病毒外的所有生物，都由細胞構成。自然界中既有單細胞生物，也有多細胞生物。細胞是生物體基本的結構和功能單位。細胞是生物界中，*一部分。
　　細胞是生命的基本單位，細胞的特殊性決定了個體的特殊性，因此，對細胞的深入研究是揭開生命奧秘、改造生命和征服疾病的關鍵。細胞生物學已經成為當代生物科學中發展zui快的一門*學科，是生物、農學、醫學、畜牧、水產和許多生物相關專業的一門必修課程。50年代以來諾貝爾生理與醫學獎大都授予了從事細胞生物學研究的科學家。
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傳代方法：
1．懸浮生長細胞傳代
離心法傳代：離心（1000轉/分）去上清，沉淀物加新培養液后再混勻傳代。v2．半懸浮生長細胞傳代（Hela細胞）
此類細胞部分呈現貼壁生長現象，但貼壁不牢，可用直接吹打法使細胞從瓶壁脫落下來，進行傳代。
3．貼壁生長細胞傳代
采用酶消化法傳代。常用的消化液有0.25％的胰蛋白酶液。
細胞膜（Cell Membrane）:
　　細胞壁的內側緊貼著一層極薄的膜，叫做細胞膜。這層由蛋白質分子和磷脂雙層分子組成的薄膜，水和氧氣等小分子物質能夠自由通過，而某些離子和大分子物質則不能自由通過，因此，它除了起著保護細胞內部的作用以外，還具有控制物質進出細胞的作用：既不讓有用物質任意地滲出細胞，也不讓有害物質輕易地進入細胞。