分離試劑盒編號:ISO-III
分離試劑盒適用:各種人和哺乳動物組織皮膚細胞、骨細胞的分離。同時,也可用于軟骨細胞及滑膜細胞的分離。
分離試劑盒規格:1
分離試劑盒價格:¥2590
分離試劑盒產地:中國,PriCells
分離試劑盒特征:不含有HIV、HBV、HCV、細菌、支原體、真菌、酵母;不含有內毒素;不含有苯;不含有血清。
生物安全級:1級。
運輸條件:4oC。
儲存條件:4oC,避光。
用途范圍:只可用于科研。
原代細胞分離試劑盒III 產品說明書
一、主要適用
皮膚細胞、骨細胞、軟骨細胞、滑膜細胞。
二、試劑盒組成
1、Buffer A: 100ml × 2 4℃ 保存
2、Buffer B: 50ml × 3 4℃ 保存
3、Buffer C: 20ml × 1 4℃ 保存
4、Buffer D: 20ml × 1 4℃ 保存
5、消化液I: 2ml × 1 4℃ 保存
6、消化液II: 2ml × 1 4℃ 保存
7、消化液III: 2ml × 1 4℃ 保存
三、使用方法
注意:使用前請認真閱讀說明書,按說明書的要求對試劑進行妥善保存。
本試劑盒供用于5次組織的原代細胞分離,每次分離的組織約1g。
取2ml消化液I、II、III分別放入3瓶50ml Buffer B中,標記后,放4℃保存。
1、取組織重約1g,放入無菌培養皿中,取1 × PBS(pH7.4)清洗組織,充分去除組織表面的血漬和其它異物。
2、將組織轉入另一無菌的培養皿,切去多余組織如脂肪或壞死組織,用無菌刀 將組織切成1mm3小塊。
3、用無菌彎頭鑷將組織塊轉入50ml的無菌離心管中,讓組織塊沉淀,棄多余液體,加入10ml Buffer A,充分混勻,300g離心5分鐘,棄上清,如此重復操作3次。
4、取8ml含有酶制劑I的Buffer B懸浮組織,吹打組織數次,充分混勻,置于37℃水浴中30分鐘,每10分鐘搖動一次。500g離心5分鐘,棄上清。
5、取8ml含有酶制劑II的Buffer B懸浮組織,吹打組織數次,充分混勻,置于37℃水浴中30分鐘,每10分鐘搖動一次。500g離心5分鐘,棄上清。
6、取8ml含有酶制劑III的Buffer B懸浮組織,吹打組織數次,充分混勻,置于37℃水浴中30分鐘,每10分鐘搖動一次。加入4ml Buffer C終止反應。
7、吹打組織數次,充分混勻,靜置,待組織塊沉淀,取上清放入15ml的無菌離心管,500g離心5分鐘,棄上清。
8、取2ml Buffer D懸浮細胞,用血球計數板或電子記數儀計數細胞,并檢測細胞活性。
9、懸浮細胞用相應的原代細胞培養基稀釋,使每毫升培養基中含有1×106個細胞,接種培養瓶中,大約每平方厘米2×105個細胞。
10、每隔2-4天更換一次培養基(以pH變化為標準),觀察細胞生長情況。