產品名稱: 大鼠神經特異性烯醇化酶(NSE)ELISA試劑盒
規 格: 48T/96T
檢測類型:酶聯免疫/酶免法(ELISA)
保 存:短期4℃/*-20℃保存
檢測范圍:
100μg/L -3000μg/L
可檢測樣本:血液標本,組織液標本,尿液標本,糞便標本,腦脊液標本,胸腹水標本等(具體詳細情況請咨詢)
供應商:上海研謹生物科技有限公司(國內供應商)
實驗原理:
本試劑盒應用雙抗體夾心法測定標本中大鼠神經特異性烯醇化酶(NSE)水平。用純化的大鼠神經特異性烯醇化酶(NSE)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入神經特異性烯醇化酶,再與HRP標記的NSE抗體結合,形成抗體-抗原-酶標抗體復合物,經過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的NSE呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),通過標準曲線計算樣品中大鼠神經特異性烯醇化酶(NSE)濃度。
試劑盒組成及試劑配制
1. 酶聯板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為1,600 pg/ml,將其稀釋為400 pg/ml后,再做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別稀釋成400 pg/ml,200 pg/ml,100 pg/ml,50 pg/ml,25 pg/ml,12.5 pg/ml,6.25 pg/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 pg/ml,臨用前15分鐘內配制。如配制200 pg/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 400 pg/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml。
6. 檢測溶液A:1×120μl(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100μl/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10μl檢測溶液A加990μl檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制。
7. 檢測溶液B:1×120μl/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
11. 覆膜:5張
12. 使用說明書:1份
自備物品
1. 酶標儀(建議參考儀器使用說明提前預熱)
2. 微量加液器及吸頭,EP管
3. 蒸餾水或去離子水,全新濾紙
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