三氯化鋁沉淀法濃縮水體中的病毒

近年來, 水源性病毒疾病的爆發在世界范圍內被大量報道, 大量研究證實[1], 外環境水體及淤泥是病毒存活循環的主要場所, 并因此頻頻引發傳染病的流行。但在生活環境的各種水體中, 除生活污水外, 其所含有的病毒濃度往往很低, 以目前現有的檢測方法, 仍然達不到不經濃縮而直接從水中檢測病毒的目的。同時, 食源性病毒的感染劑量非常低, 10?100個病毒粒子即可引發感染。病毒在離體條件下存活力很強, 對各種理化因子有較強的抵抗力, 耐乙醚和弱酸, 用氯仿、反復凍融、超聲波處理都不能使其失活。因此, 水環境中微量存在的病毒仍然對人類的健康帶來很大的威脅。

在我國, 雖然已經建立起了以PCR為主導的病毒快速檢測方法, 但是對于水樣本的前處理技術至今沒有找到十分理想的病毒濃縮方法, 無法有效去除樣本中的抑制物, 這些因素都嚴重制約了針對水中食源性病毒的檢測和預防。要掌握各種水體中病毒污染的基本狀況, 樣品中病毒的濃縮是能否得以成功檢測的關鍵。另外, 目前世界上絕大多數國家所執行的標準中, 對病毒的檢測標準及其指示生物都沒有做出明確說明, 歸根結底的原因是由于至今沒有建立起有效的方法。

有鑒于此, 針對水中病毒研究的熱點和存在問題, 本刊2009年第1期發表了寇曉霞、吳清平等[2]針對自來水和污水兩種不同水體中病毒的濃縮方法。在現有的檢測和濃縮方法的基礎上, 通過不斷創新, 解決現有方法中存在的主要問題, 摸索制約水體中病毒濃縮方法的關鍵點, 評價不同方法的優劣和實用性。三氯化鋁沉淀法zui大的優點是可適用于絕大多數具有不同水質特性的水樣, 特別是可以克服膜過濾法因易堵塞而對水體懸浮物濃度有嚴格限制的缺陷。另外, 就檢測條件而言, 該方法無需過濾裝置等, 也省去進口的陽電濾膜, 從應用推廣的角度更為方便, 費用成本低, 對于系統研究我國水中常見食源性病毒檢測和監測有一定的應用價值。

目前, 該課題組對水體中病毒濃縮方法進行了多方面的應用。對廣州河涌水的病毒污染情況進行了調研, 初步了解和掌握了病毒的污染狀況。廣州市河涌水中食源性病毒污染的總陽性率為37.8％。其中有7個點呈諾如病毒陽性, 8個點呈輪狀病毒陽性。文獻[3?4]報道此類病毒的流行月份、季節性與環境水中調查的病毒污染情況基本吻合, 說明了臨床發病與環境中此類病毒的污染有一定的相關性。另外還有些點呈甲肝病毒陽性和星狀病毒陽性。調研結果表明三氯化鋁沉淀法濃縮水體中病毒的方法具有實用性。

關鍵詞: 水, 病毒, 濃縮, 檢測