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上海逸峰生物科技有限公司

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豬藍耳病抗體(PRRS-Ab)ELISA試劑盒

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號YF8064

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廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2017-07-17 20:21:02瀏覽次數:967次

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豬藍耳病抗體(PRRS-Ab)ELISA試劑盒
上海逸峰生物科技有限公司*經營Elisa試劑盒、實驗耗材、抗體、細胞等生物化學試劑。還代理不同品牌價格檔次的ELISA試劑盒。價格實惠,質量有保證,信譽*。敬請咨詢! : :

豬藍耳病抗體(PRRS-Ab)ELISA試劑盒

規格:48T/96T

上海逸峰生物科技有限公司*提供各種種屬、各種系列Elisa試劑盒,價格實惠,質量有保證,信譽*。索取各ELISA試劑盒產品說明書。凡購買目錄本公司ELISA檢測試劑盒可免費提供代測服務。 本公司的更多產品,請點擊公司:http://www.yfswbio.com/

ELISA試劑盒組成及試劑配制

1. 酶聯板(Assay plate ):一塊(96孔)。

2. 標準品(Standard):2瓶(凍干品)。

3. 樣品稀釋液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。

4. *標記抗體稀釋液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。

5. 辣根過氧化物酶標記親和素稀釋液 HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。

6. *標記抗體(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1100

7. 辣根過氧化物酶標記親和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1100

8. 底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。

9. 濃洗滌液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。

10. 終止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

ELISA試劑盒說明

1.試劑盒保存:-20(較長時間不用時);2-8(頻繁使用時)。

2.濃洗滌液低溫保存會有鹽析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶。

3.中、英文說明書可能會有不*之處,請以英文說明書為準。

4.剛開啟的酶聯板孔中可能會含有少許水樣物質,此為正常現象,不會對實驗結果造成任何影響。

Elisa試劑盒實驗原理

用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗LEP抗體的微孔中依次加入標本或標準品、*化的抗LEP抗體、HRP標記的親和素,經過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的LEP呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計算樣品濃度。

 

Elisa試劑盒操作步驟

實驗開始前,請提前配置好所有試劑,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。

1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37反應120分鐘。

為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。

2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加*標記抗體工作液 100μl(取1μl*標記抗體加99μl*標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內配制),37,60分鐘。

3. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同*標記抗體工作液) 100μl3760分鐘。

5. 溫育60分鐘后,棄去孔內液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。

6. 依序每孔加底物溶液90μl37避光顯色(30分鐘內,此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。

7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。

8. 用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內進行檢測。

注:

1. 用戶在初次使用試劑盒時,應將各種試劑管離心數分鐘,以便試劑集中到管底。

2. 每次實驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是zui后加底物溶液及2N H2SO4。測量時先用此孔調OD值至零。

3. 為防止樣品蒸發,試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。

4. 未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8保存。標準品、*標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、*標記抗體工作液或、辣根過氧化物酶標記親和素工作液。

5. 建議檢測樣品時均設雙孔測定,以保證檢測結果的準確性。

洗板方法

手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標板內的液體;在實驗臺上鋪墊幾層吸水紙,酶標板朝下用力拍幾次;將*的洗滌緩沖液至少0.3ml注入孔內,浸泡1-2分鐘。根據需要,重復此過程數次。

自動洗板:如果有自動洗板機,應在熟練使用后再用到正式實驗過程中。

計算

以標準物的濃度為橫坐標(對數坐標),OD值為縱坐標(普通坐標),在半對數坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣品的實際濃度。

注意事項:

1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。

2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。

3. 一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,*使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。

5. 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數。

6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。

7. 底物請避光保存。

8. 不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。

 

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