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上海永葉生物科技有限公司

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技術文章

閱讀：490發布時間：2012-4-5

1．酶活性和抗體效價測定

采用雙向免疫擴散法（稀釋抗體）和DAB-H2O2 顯色反應檢測結合物中抗體效價和免疫沉淀線中的酶促反應。

2．酶量和IgG量

酶量（mg/ml）=OD403 ′0.4

IgG量（mg/ml）=（OD280- OD402 ′0.42）′0.94′0.62

其中，0.42為酶蛋白本身（0.3）及結合戊二醛后增加的OD值，0.94為抗體蛋白與醛化酶結合后，OD280 約增加6%，故乘以0.94。兔IgG的OD280 =1.0時為0.62.

過碘酸鈉標記法IgG量（mg/ml）=（OD280- OD402 ′0.3）′0.94′0.62

標記率= OD403 / OD280 =0.3-0.6，即一個抗體分子上結合1-2個HRP分子.標記率可以大于0.6-0.9。OD403 / OD280 =0.4，約相當于E/P=1.0。

酶標抗體的保存

經鑒定合格的酶標抗體，由于硫化物及疊氮化物等可與酶結合，使HRP失活，因此，不能用硫化物及疊氮化物作為防腐劑，可加入等量的60%甘油，小量分裝（0.5ml/支），置4℃~-30℃保存。

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