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技術(shù)文章

含醛基或酮基的小分子蛋白的交聯(lián)

閱讀:557發(fā)布時間:2011-11-5


通過鄰羧甲基肟[o—(carboxymethyl)oximes]的形成,羧基很容易引入到酮基和醛基上。酮基也可用對肼苯甲酸(p—hydrazinobenzoicacid)衍生產(chǎn)生羧基,然后即可通過前面所述的方法結(jié)合于蛋白載體上。含醛基的小分子亦可通過形成schiff堿(其可用NaBH,還原而穩(wěn)定)而直接結(jié)合于蛋白分子上。

目的:耦聯(lián)蛋白與含酮基小分子。

操作步驟:
(1)溶解10 mmol/I鄰羧甲基羥胺[。—(carboxymethyl)hydroxylamine][商品名亦稱(aminooxy)aceticacid或羧甲基胺(carboxymethyoxylamine)]和4 mmol/L含酮基小分子于200 m1乙醇和20 m1 5%NaOH混合液中;
(2)加熱回流90min;
(3)通過旋轉(zhuǎn)薄膜蒸發(fā)減少體積,加水至40m1,用乙醚抽提;
(4)用水洗乙醚抽提物,干燥,得到干白粉產(chǎn)物。
 


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