日韩午夜在线观看,色偷偷伊人,免费一级毛片不卡不收费,日韩午夜在线视频不卡片

行業產品

  • 行業產品

上海永葉生物科技有限公司


當前位置:上海永葉生物科技有限公司>技術文章>免疫組化的經驗總結 要點與技巧
技術文章

免疫組化的經驗總結 要點與技巧

閱讀:1481發布時間:2011-7-23

免疫組化是利用抗原與抗體特異性結合的原理,通過化學反應使標記抗體的顯色劑 (熒光素、酶、金屬離子、同位素) 顯色來確定組織細胞內抗原(多肽和蛋白質),對其進行定位、定性及定量的研究,稱為免疫組織化學。
免疫組化實驗中常用的抗體為單克隆抗體和多克隆抗體。
操作要點和技巧
1.固定:用4%的多聚甲醛固定液。對于冰凍切片,甲醛固定有時比冰凍丙酮好;但對于不同的組織和抗原,可選用不同的固定液。有時候商品化的抗體會有比較適合而推薦的固定液,請于購置前注意說明書。
Bouin S固定液:飽和苦味酸750ml,甲醛250ml,冰醋酸50ml,其對組織的穿透力較強,固定較好,結構完整,但因偏酸,對抗原有一定損害,且組織收縮明顯,不適于組織標本的長期保存。
PLP液:即高碘酸鈉-賴氨酸-多聚甲醛,適于固定石蠟切片。適于富含糖類組織,對超微結構及許多抗原的抗原性保存較好。
2.組織脫水,透明:時間不能太長,否則在切片時容易碎片,切不完整。
3.切片時展片:有些組織在切片后難以在水中展開,這時可適當地在水中加入幾滴乙醇。
4.烤片:60℃ 30分鐘或37℃ 過夜,溫度太高或時間太長,抗原容易丟失。
5.蠟塊及切片的保存:在4℃保存
6.脫片問題: Poly-L-Lysine(多聚賴氨酸)為目前免疫組化染色工作中zui常用的一種防脫片劑,6ml的多聚賴氨酸溶液可按1:10稀釋成60ml的工作液,適合于需要酶消化、微波、高溫高壓的防脫片處理。如不行,可用雙重處理(APES和Poly-L-Lysine)的切片。在以上兩種條件都行不通的情況下,可用如下方法:切片在脫蠟前,放在APES 1:50 丙酮溶液中浸泡3分鐘,晾干,即可進行下一步。
7.滅活內源性酶:HRP系統:3%雙氧水滅活;AP系統:3%HAc滅活。
8.暴露抗原:對于石蠟切片的免疫組化實驗時,必須采用高溫加熱抗原修復,這將有助于暴露抗原決定簇,從而增加免疫組化染色的強度(不同抗體的*修復液請參閱抗體說明書)。對于不同的組織,不同的抗原,不同的抗體,所采用的方法應不一樣,可進行熱修復、*消化、既不修復也不消化。膠原還可以用*消化等。
9.封閉:在山羊血清封閉,非特異性染色仍然較強時,可延長封閉時間或用濃縮血清封閉
10.抗體稀釋:應遵循“現用現配”的原則,對于PBS稀釋的抗體一定要當天使用。
11.背景高:在抗體濃度、反應時間、反應溫度等合適的條件下,如果背景依舊高,可采用含1‰ Tween20的PBS洗,特別是在顯色之前要多洗。
12.返藍:在蘇木素復染后,可用堿性緩沖液(如PBS)或Na2HPO4的飽和溶液返藍。
13.顯色:一定要在顯微鏡下觀察,注意控制背景。
 


環保在線 設計制作,未經允許翻錄必究 .? ? ? Copyright(C)?2021 http://www.kindlingtouch.com,All rights reserved.

以上信息由企業自行提供,信息內容的真實性、準確性和合法性由相關企業負責,環保在線對此不承擔任何保證責任。 溫馨提示:為規避購買風險,建議您在購買產品前務必確認供應商資質及產品質量。

會員登錄

×

請輸入賬號

請輸入密碼

=

請輸驗證碼

收藏該商鋪

登錄 后再收藏

提示

您的留言已提交成功!我們將在第一時間回復您~
主站蜘蛛池模板: 安庆市| 濉溪县| 隆子县| 仲巴县| 三门县| 肥乡县| 滦平县| 鱼台县| 龙海市| 金门县| 嘉鱼县| 聂荣县| 北海市| 昌黎县| 兴义市| 望谟县| 平谷区| 武清区| 马关县| 临沭县| 扎赉特旗| 吉隆县| 衡阳县| 平乡县| 利辛县| 洪江市| 闽清县| 偃师市| 横山县| 新野县| 重庆市| 司法| 石河子市| 寿宁县| 新源县| 延安市| 临沭县| 达日县| 宝坻区| 信丰县| 武夷山市|