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技術(shù)文章

Gram-Twort*

閱讀:375發(fā)布時(shí)間:2017-6-9

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

革蘭氏染色法是丹麥醫(yī)生Christain Gram于1884年所發(fā)明,是細(xì)菌學(xué)中廣泛使用的一種鑒別染色法,亦是一種復(fù)染法。未經(jīng)染色的細(xì)菌,由于其與周圍環(huán)境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色后細(xì)菌與環(huán)境形成鮮明對(duì)比,可以清楚地觀察到細(xì)菌的形態(tài)、排列及某些結(jié)構(gòu)特征,用以分類鑒定。通過此法染色可將細(xì)菌鑒別為革蘭陽(yáng)性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。細(xì)菌的不同顯色反應(yīng)是由于細(xì)胞壁對(duì)乙醇的通透性和抗脫色能力的差異,主要是肽聚糖層厚度和結(jié)構(gòu)決定的。經(jīng)結(jié)晶紫染色的細(xì)胞用碘液處理后形成不溶性復(fù)合物,乙醇能使它脫色。

Gram-Twort*采用非經(jīng)典的革蘭染色配方, 用到紅色和綠色染料,使色彩較為豐富,背景干凈,胞核胞質(zhì)對(duì)比強(qiáng)烈,細(xì)菌染色特征典型,多用于組織切片的染色。

 

產(chǎn)品組成:

                        編號(hào)

名稱

R23108-4*100ml

Storage

試劑(A): 結(jié)晶紫染色液

100ml

RT 避光

試劑(B): Gram碘液

100ml

RT 避光

試劑(C): Twort分化液

250ml

RT

試劑(D): Twort染色液

100ml

RT 避光

使用說明書

1

 

自備材料:

1、 載玻片

2、 恒溫箱或水浴鍋

3、 光學(xué)顯微鏡

 

操作步驟(僅供參考)

1、 組織切片梯度酒精脫蠟,蒸餾水中水化。

2、 入結(jié)晶紫染色液染色3~4min。

3、 清水緩慢沖洗去染色液。

4、 入Gram碘液,浸染3min。

5、 自來水沖洗,吸干水分,置于高溫處干燥。

6、 將切片置于提前56℃預(yù)熱的Twort分化液中分化,直至不再有顏色脫出為止。該過程一般需要15-25min,玻片應(yīng)該呈現(xiàn)淺褐色或草黃色。

7、 蒸餾水沖洗。

8、 入Twort染色液,浸染5min。

9、 蒸餾水沖洗。

10、將切片置于Twort分化液中分化,直至不再有紅色脫出為止。該過程一般需要數(shù)秒。

11、直接用無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。

 

染色結(jié)果:

革蘭氏陽(yáng)性菌

藍(lán)黑色

革蘭氏陰性菌

粉紅色

細(xì)胞核

紅色

紅細(xì)胞以及大部分細(xì)胞漿

綠色

彈性纖維

黑色

 

注意事項(xiàng):

1、 革蘭染色的關(guān)鍵在于嚴(yán)格掌握脫色程度,脫色時(shí)間應(yīng)根據(jù)經(jīng)驗(yàn)判斷。脫色過度,陽(yáng)性菌可被誤染為陰性菌;脫色不夠,陰性菌可被誤染為陽(yáng)性菌。

2、 待檢細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)間會(huì)影響染色,陽(yáng)性菌培養(yǎng)時(shí)間過長(zhǎng)或已死亡或細(xì)菌溶解,常呈陰性。

3、 由于該染色過程復(fù)雜,未必能夠顯示出所有色彩。

4、 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

 

有效期: 12個(gè)月有效。

 

 


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