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上海永葉生物科技有限公司


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技術文章

Gram-Twort*

閱讀:378發布時間:2017-6-9

產品簡介:

革蘭氏染色法是丹麥醫生Christain Gram于1884年所發明,是細菌學中廣泛使用的一種鑒別染色法,亦是一種復染法。未經染色的細菌,由于其與周圍環境折光率差別甚小,故在顯微鏡下極難觀察。染色后細菌與環境形成鮮明對比,可以清楚地觀察到細菌的形態、排列及某些結構特征,用以分類鑒定。通過此法染色可將細菌鑒別為革蘭陽性菌(G+)和革蘭陰性菌(G-)兩大類。細菌的不同顯色反應是由于細胞壁對乙醇的通透性和抗脫色能力的差異,主要是肽聚糖層厚度和結構決定的。經結晶紫染色的細胞用碘液處理后形成不溶性復合物,乙醇能使它脫色。

Gram-Twort*采用非經典的革蘭染色配方, 用到紅色和綠色染料,使色彩較為豐富,背景干凈,胞核胞質對比強烈,細菌染色特征典型,多用于組織切片的染色。

 

產品組成:

                        編號

名稱

R23108-4*100ml

Storage

試劑(A): 結晶紫染色液

100ml

RT 避光

試劑(B): Gram碘液

100ml

RT 避光

試劑(C): Twort分化液

250ml

RT

試劑(D): Twort染色液

100ml

RT 避光

使用說明書

1

 

自備材料:

1、 載玻片

2、 恒溫箱或水浴鍋

3、 光學顯微鏡

 

操作步驟(僅供參考)

1、 組織切片梯度酒精脫蠟,蒸餾水中水化。

2、 入結晶紫染色液染色3~4min。

3、 清水緩慢沖洗去染色液。

4、 入Gram碘液,浸染3min。

5、 自來水沖洗,吸干水分,置于高溫處干燥。

6、 將切片置于提前56℃預熱的Twort分化液中分化,直至不再有顏色脫出為止。該過程一般需要15-25min,玻片應該呈現淺褐色或草黃色。

7、 蒸餾水沖洗。

8、 入Twort染色液,浸染5min。

9、 蒸餾水沖洗。

10、將切片置于Twort分化液中分化,直至不再有紅色脫出為止。該過程一般需要數秒。

11、直接用無水乙醇脫水,二甲苯透明,中性樹膠封固。

 

染色結果:

革蘭氏陽性菌

藍黑色

革蘭氏陰性菌

粉紅色

細胞核

紅色

紅細胞以及大部分細胞漿

綠色

彈性纖維

黑色

 

注意事項:

1、 革蘭染色的關鍵在于嚴格掌握脫色程度,脫色時間應根據經驗判斷。脫色過度,陽性菌可被誤染為陰性菌;脫色不夠,陰性菌可被誤染為陽性菌。

2、 待檢細菌培養時間會影響染色,陽性菌培養時間過長或已死亡或細菌溶解,常呈陰性。

3、 由于該染色過程復雜,未必能夠顯示出所有色彩。

4、 為了您的安全和健康,請穿實驗服并戴一次性手套操作。

 

有效期: 12個月有效。

 

 


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