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上海永葉生物科技有限公司
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閱讀:589發布時間:2014-8-9
1、實驗原理
鳥類血液中紅細胞有細胞核,細胞核內DNA與蛋白質結合成染色質。利用DNA在0.12-0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度zui低,可使溶液中的DNA形成沉淀析出,通過過濾,得到初提取的DNA。再利用DNA不溶于酒精溶液,而細胞中其他物質可溶于酒精的特點,進一步提取含雜質較少的DNA。
DNA遇二苯胺,加少許乙醛,沸水浴中顯藍色,利用這一原理可對DNA進行鑒定。
2、方法步驟及改進,實驗的關鍵步驟
本實驗成功的關鍵,是保證提取到足量且較純凈的DNA。因為DNA在細胞中含量少,所以在下列步驟中應特別注意:在步驟1中使用的雞血的量要在150ml左右。提取細胞核物質時要充分攪拌5min以上。在步驟4中加蒸餾水要控制好量,同時用竹筷緩緩攪動使DNA聚集其上。在步驟5要充分攪拌,在步驟7中應使用冷卻的酒精(至少在5℃以下存放24h)。因為DNA易吸附在玻璃容器上,所以實驗中使用塑料燒杯和試管,以減少DNA的損失。同時為了能在DNA鑒定步驟中較快、較好地出現藍色,可將相應的NaCl溶液量和二苯胺試劑量都減少一半左右
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