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上海永葉生物科技有限公司
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閱讀:621發布時間:2014-4-4
實驗原理
樣本中的尿液*與辣根過氧化物酶標記的*競爭連結到包被板中的抗*抗體。
溫育后,經洗滌,連結的與游離的*分開。加入H2O2和TMB底物液,經一段時間后,生成了顏色,加入終止液終止酶促反應并檢測吸光度。計算尿液中*需要一系列的標準品建立標準曲線。樣本中尿液*濃度與顏色強度成正相關。
試劑、材料和儀器
提供的試劑和材料
1 *標準品 STD0-STD4
2 孵化緩沖液
磷酸鹽緩沖液
3 酶聯物 HRP標記的*
4 包被板,可分拆
5 TMB底物液
6 終止液
7 質控品(低)
8 質控品(高)
儀器
移液器
酶標儀(450nm)
實驗步驟: 略
結果
平均吸光度
計算標準品、樣本的平均吸光度值。
標準曲線
以標準品吸光度值為Y軸,相應的濃度為X軸,作出*的擬合曲線(可選擇4參數邏輯函數)。
計算結果
將樣本的吸光度值插入標準曲線中,則可讀出相應的濃度,單位為ng/ml。
計算尿液中*濃度(24h),按以上計算出濃度,然后再乘以24小時內的尿液總體積
ng/ml x 24小時尿液體積(ml)/1000=µg Cortisol/24h
參考值
50—190µg/24h
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