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技術文章

過氧化氫酶檢測試劑盒使用說明

點擊次數:598 發布時間:2011-11-10

產品名稱:過氧化氫酶檢測試劑盒

過氧化氫酶檢測試劑盒(Catalase Assay Kit)是一種簡單易行的通過顯色反應來檢測細胞、組織或其它樣品中過氧化氫酶(Catalase)活性的試劑盒。

使用說明:
1. 試劑盒的準備工作:
a. 配制250mM*。本試劑盒提供的過氧化氫濃度約為1M。由于過氧化氫不是非常穩定,使用前需自行測定
過氧化氫的實際濃度。把濃度約為1M的過氧化氫用本試劑盒提供的過氧化氫酶檢測緩沖液稀釋100倍,使過氧化氫的
濃度約為10mM。測定A240。
過氧化氫(mM)=22.94 X A240
從而計算出本試劑盒提供的過氧化氫的實際濃度。然后再根據實際的過氧化氫濃度配制250mM*。
b. 配制5mM*。根據測定得到的實際過氧化氫濃度配制5mM*。
c. 配制顯色工作液。在冰浴上溶解顯色底物,適當分裝后再使用,盡量避免反復凍融。其它試劑放置在冰浴上備用。取
適當量的過氧化物酶,按照1:1000的比例用顯色底物稀釋,配制成顯色工作液。例如取5μl過氧化物酶,加入5ml顯色
底物,混勻即得到5ml顯色工作液。
2. 樣品的準備:
用適當的裂解液裂解細胞或組織(可以使用奔大生物生產的Western及IP細胞裂解液(BP0013)進行裂解)。用本試劑盒提供的過
氧化氫酶檢測緩沖液稀釋樣品,裂解好的樣品至少加入等體積的過氧化氫酶檢測緩沖液進行稀釋。

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