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技術文章

*檢測試劑盒的檢測步驟

點擊次數:535 發布時間:2011-9-14

名稱:*檢測試劑盒

適用范圍
可定性、定量檢測動物組織(雞、豬、牛等)、牛奶、蜂蜜和雞蛋樣本中的*代謝物的殘留量。
 

提供的材料與試劑
1、96孔酶標板×1塊(包被有偶聯抗原)
2、標準液×6瓶:(1ml/瓶)
0ppb,0.05ppb,0.15ppb,0.45ppb,1.35ppb,4.05ppb 3、高濃度標準品:(1ml/瓶) 100ppb
4、酶標二抗濃縮液 1.5ml

5、抗體濃縮液 0.8ml

6、底物液 A 液 7ml

7、底物液 B 液 7ml

8、終 止 液 7ml

9、20×濃縮洗滌液 40ml

10、2×濃縮復溶液 50ml

11、2-硝基苯甲醛 15.1mg

操作步驟:
1、將所需試劑從冷藏環境中取出,置于室溫(20-25℃)平衡30min以上,注意每種液體試劑使用前均須搖勻。
2、取出需要數量的微孔板,將不用的微孔板放入自封袋,保存于2-8℃。
3、洗滌工作液在使用前也需回溫。
4、編號:將樣本和標準品對應微孔按序編號,每個樣本和標準品做2孔平行,并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
5、抗體工作液的稀釋:將抗體濃縮液用復溶工作液按照1:10體積比進行稀釋(1份抗體濃縮液加入10份復溶工作液)。
6、加標準品/樣本:加標準品/樣本50ml到對應的微孔中,然后加入抗體工作液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環境中反應30min。
7、洗板:小心揭開蓋板膜,將孔內液體甩干,用洗滌工作液(見配液7)250ml/孔,充分洗滌4-5次,每次間隔10s,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用未使用過的槍頭戳破)。
8、酶標二抗工作液的稀釋:將酶標二抗濃縮液用復溶工作液按照1:10體積比進行稀釋(1份酶標二抗濃縮液加入10份復溶工作液)。
9、加酶標二抗:加入酶標二抗100ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環境中反應30min,取出重復洗板步驟7。
10、顯色:加入底物液A液50ml/孔,再加底物液B液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,用蓋板膜蓋板后置25℃避光環境中反應15min(見注意事項8)。
11、測定:加入終止液50ml/孔,輕輕振蕩混勻,設定酶標儀于450nm處(建議用雙波長450/630nm檢測,請在5min內讀完數據),測定每孔OD值。(若無酶標儀,則不加終止液用目測法可進行判定)。
 

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