如何使用酶底物法程控定量封口機

51孔和97定量盤操作說明

51孔和97孔定量盤滅菌消毒

定量盤與DST酶底物法配合使用，定量檢測100ml水中微生物，將DST-酶底物法試劑與檢測水樣混合后加入到51孔或者97孔定量盤中，使用程控定量封口機封膜，根據檢測不同項目的培養溫度和時間進行培養（24H），數出顯陽性的孔格，對照MPN表讀結果。

【工作原理】

加入含有總大腸菌群細菌的水樣，目標細菌在Minimal Medium ONPG-MUG培養基中36℃±1℃培養，總大腸菌群細菌產生的特異性生物酶β一半乳糖苷酶能分解Minimal Medium ONPG-MUG培養基中的色源底物ONPG,使培養呈現黃色；同時水樣中大腸埃希氏菌產生特異性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal Medium ONPG-MUG培養基中的熒光底物MUG，產生特征性熒光。同樣原理，耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)在44.5℃培養時會分解Minimal Medium ONPG-MUG培養基中的色源底物ONPG，使培養基呈現黃色。

【使用方法】

①定性測試：

步、在100ml水樣中加入試劑，溶解，36℃±1℃培養24h；

第二步、結果判讀

        無色=陰性

        黃色=總大腸菌群陽性

        黃色+熒光=大腸埃希氏菌群陽性

注：耐熱大腸群菌（糞大腸菌群）需44.5℃培養24h后，觀察黃色為陽性

②定量檢測

步、在100ml水樣中加入試劑，溶解；

第二步、倒入51孔定量檢測盤（定量孔板）或97孔定量檢測盤（定量孔板）中；

第三步、用程控定量封口機對定量檢測盤（定量孔板）進行封膜，36 ℃±1℃培養24h；

第四步、定量檢測盤（定量孔板）結果判讀：

        無色=陰性

        黃色格子=總大腸菌群陽性

黃色+熒光格子=大腸埃希氏菌群陽性

查對照MPN表計數

注：耐熱大腸群菌（糞大腸菌群）需44.5℃培養24h后，觀察黃色格子為陽性結果，查對照MPN表計數。