摘要：生物安全柜已經廣泛應用于生物、病毒實驗等高危場合的操作，也是藥廠中常用的一種防護設備。 在應用中除了要正確的選型以及安裝使用外，為了保證防護安全性，按照《生物安全柜》YY0569-2005 標 準還需要每年對其進行維護和安全驗證性檢驗至少一次，其中過濾器的完整性檢漏實驗是其中一項主 要檢測內容。當生物安全柜移動位置后或者更換過濾器以及內部的部件進行維修后，也需要重新進行維護 后過濾器安全性檢驗。本文討論的主要就是藥廠生物安全柜過濾器檢漏及安全驗證的現場檢測方 法以及期間需要注意的問題及解決方法。

1.  引言
生物安全柜就是一種負壓過濾排風柜，其目的 是為了防止操作者和環境暴露于實驗過程中產生的生物氣溶膠，是藥廠中常用的一種防護設備。我國相關標準《生物安全柜》YY0569-2005[1]、美國生物安全柜 NSF/ANSI 49-2008[2]標準以及歐盟生物安 全柜統一標準 EN12469：2000[3]都對生物安全柜的性能檢測做出了明確的規定。其中對于過濾器 安裝前后的完整性進行測試是*的一項內容，也是獲得 ASTM、ISPE、FDA 以及 EU 認可并且 目前在上通行的做法[4]。同時也是確保生物安全柜能夠安全使用的一個重要性能和檢測過程中 常見的問題，需要操作使用者高度關注。世界衛生組織（WHO）在其頒布的實驗室生物 安全手冊中要求用戶選擇正確類型的生物安全柜，進行正確的安裝使用，并且每年都要進行認證。 YY0569 標準要求生物安全柜的維護和檢驗每年至少一次，當生物安全柜移動位置后或者更換過濾器 以及內部的部件進行維修后，也需要重新進行維護檢驗[1]。由此可見生物安全柜的檢測是相當重要也 相當有必要的，本文將結合具體實例來重點介紹生物安全柜的現場測試方法及注意事項。

2. 過濾器完整性測試儀器和現場檢測方法
2.1 測試儀器
（1）TDA-6C 氣溶膠發生器
利用內置的壓縮氣 源在液體中鼓氣泡，通過 2~6 個 Laskin Nozzles飛濺產生物態的多分散相 PAO 或者 DOP 氣溶膠（本 文采用的氣 溶膠是 PAO）。其發塵 濃度范圍為10~100μg/L，粒子粒徑主要集中在 0.25~3.0μm 之間。
（2）TDA-2H 氣溶膠光度計
氣溶膠濃度測量范 圍：0.0001~125μg/L。度：滿量程的 1%。重復性：滿量程的 0.05%。 
2.2 現場檢測方法
在進行檢測之前首先對生物安全柜的結構進 行一下說明，以Ⅱ級生物安全柜為例，圖一顯示了Ⅱ級生物安全柜的一般結構形式，由柜體、前窗、 操作臺、檢測孔、發塵口、循環風機以及過濾器組成，過濾器按照用途來說從上往下依次為 排風過濾器、循環風過濾器以及進風過濾器。過濾器級別均為 H14，效率可以達到 99.994%以上，按照 YY0569 標準要求需要對它們做安全檢漏實驗。前窗可以上下開啟，操作者可以通 過開啟的前窗在安全柜內的操作臺上進行操作，在操作空間內還可以看到左右兩側各有兩個用于檢 測特意設置的檢測口，分別為發塵口和檢測孔。
二為生物安全柜的運行原理圖，有為了保護操作者 維持工作區域內負壓所需的新風以及用于保護產 品所需的凈化循環風，以及為了保護周圍環境不受 污染經過過濾器凈化排出的排風。其循環由位 于生物安全柜內的循環風機來維持。 在對生物安全柜排風過濾器以及循環風 過濾器進行測試前，要去掉過濾器的保護蓋和散流裝置，打開生物安全柜的風機和燈。將氣溶膠發生 器放置在固定位置，把發塵管放在生產廠家設置的 發塵口位置（見圖 1），開啟氣溶膠發生器使得產 生的氣溶膠進入生物安全柜，令氣溶膠均勻分布在 過濾器的上游氣流。如果廠商沒有明確設置氣 溶膠的導入位置，那么就需要確保氣溶膠導入的方 式能夠在安全柜氣流中充分混合[1] 。

測試上游氣溶膠濃度：打開氣溶膠光度計，將 氣溶膠光度計的檢測管插在生物安全柜的檢測孔位置（見圖 1），檢測孔通過管道與風機出口后的回風艙相通，可以對過濾器前與氣溶膠充分混 合好的上游氣流進行采樣，要使位于上游的氣溶膠 濃度不小于 10μg/L。利用光度計探頭在過濾器下游距離過濾器表面不超過 25mm 的位置，以低于 50mm/s 的掃描速度移動，確保探頭掃描到過濾器的整個下游位置以及每個過濾片的邊緣，掃描的路線 應該稍稍重疊。圍繞整個過濾器外圍、沿組合過濾片和框架的連接處以及圍繞過濾器和其他部件之間的密封處要仔細檢查（見圖 3）[5]。 進風過濾器的現場檢測方法：接著上述實驗，
關掉氣溶膠發生器，將插在發塵口位置的發塵管拔出并將發塵口用密封膠圈密封，并且將氣溶膠光度 計上游濃度設置成測量排風和循環風過濾器 時候的上游氣溶膠濃度，然后撥到下游位置測量下游位置氣溶膠濃度。重新開啟氣溶膠發生器，將發 塵管對著進風過濾器發塵，以大約 50mm/s 的速度均勻移動，確保發塵能夠覆蓋整個進風過 濾器以及其外圍和框架的連接處。
對于經排風過濾器過濾并通過管道排氣的生 物安全柜，不能進行排氣過濾器的掃描檢測，這種 情況測試過濾器的全效率以確定其完整性。下游氣流中氣溶膠濃度的檢測在下游氣流的管道上鉆出 一個直徑大約 10mm 的孔（見圖四），將帶有硬質 光度計探針插入孔中進行檢測[6]。