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JM110感受態細胞特點,JM110感受態細胞實驗注意事項

閱讀:1238發布時間:2016-12-1

JM110感受態細胞特點: 一種琥珀抑制型 F’重組缺陷菌株。支持 M13 噬菌體載體的生長,對轉染的 DNA 有修飾作用,但 無限制作用。該菌株中的 F’帶有 lacZΔM15,后者使得與在 λZAP 中編碼的 β-半乳糖 苷酶氨基端進行 α-互補, 可用于藍白斑篩選。

JM110感受態細胞實驗注意事項:
1. 感受態細胞應保存在-80℃,不可反復凍融,否則其轉化效率將會降低。
2. 實驗過程中應嚴格無菌操作,防止其它 DNA 或雜菌的污染,避免為以后的篩選、鑒定帶來影響。
3. 轉化時,轉化效率與外源 DNA 的濃度在一定范圍內成正比,但當加入的外源 DNA 量過多或體積過大反而會降低轉化效率。轉化時 DNA 體積要小于感受態細胞體積的十分之一。
4. 轉化率的計算:轉化率=產生菌落的總數/鋪板 DNA 總量。
5. 為防止轉化實驗不成功,可以保留部分連接產物,以重新轉化,將損失降到zui低。

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