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抗生素檢定培養基1號(低PH)

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更新時間:2022-03-19 09:58:21瀏覽次數:104次

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產品簡介

022171抗生素檢定培養基1號(低pH)AntibioticAgar(lowpH)用途:抗生素檢定培養基1號(低pH)用于磺芐西林等效價的微生物學檢定(中華人民共和國藥典2010版)

詳細介紹

  022171 抗生素檢定培養基1號(低pH)

  Antibiotic Agar (low pH)

  用 途:

  抗生素檢定培養基1號(低pH)用于磺芐西林等效價的微生物學檢定(中華人民共和國藥典2010版)。

  原 理:

  本法是利用抗生素在瓊脂培養基內的擴散作用,抑菌圈直徑與抗生素的濃度或活性有關;比較標準品與供試品兩者對接種的試驗菌產生抑菌圈的大小,以測定供試品效價的一種微生物學方法。

  配方(每升):

  胨 5g

  磷酸二氫鉀 3g

  牛肉浸出粉 3g

  瓊脂 15g

  最終pH 6.5±0.05

  使用方法(管碟法):

  1、稱取抗生素檢定培養基1號(低pH)26g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,115℃高壓滅菌30min。

  2、雙碟的制備應在無菌室或潔凈室內進行,并注意避免微生物及抗生素污染。培養基應在水浴中或微波爐內融化,避免直火加熱。

  3、雙碟的底層:用滅菌大口20mL吸管或其它滅菌分裝器,吸取已融化的培養基20mL注入雙碟內,待凝固后加入菌層。(雙碟內的培養基應均勻的分布于平皿內。)

  4、菌層:取出試驗用菌懸液,按預試好的加菌量[能得清晰的抑菌圈位度。二劑量法標準品溶液的高濃度所致的抑菌圈直徑在18~22mm,三劑量法標準品溶液的中心濃度所致的抑菌圈直徑在15~18mm],用滅菌吸管吸取菌懸液適量,加入已融化并保溫在水浴中(水浴溫度:細菌為48~50℃,芽孢可至60℃)的培養基內,搖勻,作為菌層培養基使用。取出加有底層培養基的雙碟,用滅菌大口5mL、10mL吸管或其他適宜分裝器,吸取菌層培養基5mL,加于底層培養基上,使其均勻攤布,等凝固后放置鋼管。

  5、放置鋼管:使用鋼管放置器或小子,使鋼管平穩的落在培養基上,相應劑量的鋼管 對角均勻放置。鋼管放妥后,雙碟靜置5~10分鐘后,再開始滴加抗生素溶液。

  6、滴加抗生素溶液用滅菌毛細滴管或微量加樣器(調節加樣量約為200-300μL),在滴加之前用溶液洗2~3次。滴加標準品及供試品溶液順序,因實驗設計方法不同而異。(2.2)法,在雙碟的4個鋼管中分別成“Z"字形滴加標準品及供試品高、低兩種濃度的溶液;在(3.3)法的6個鋼管中間隔3個鋼管中分別滴加標準品及供試品高、中、低3種濃度,并使相同濃度成對角。滴加溶液至鋼管口平滿。注意滴加時間溶液的間隔不可過長。

  7、滴加完畢,用陶瓦蓋覆蓋雙碟,平穩置于雙碟托盤內,雙碟疊放不可超過3層,將雙碟托盤水平平穩地移入培養箱中間位置,在35~37℃或該藥品標準規定的溫度下培養至所需時間。

  8、抑菌圈測量:測量前應檢查抑菌圈是否圓整,如有破圈或圈不圓整,應舍棄該碟。可用抑菌圈測量儀或游標卡尺測量。

  9、結果計算:按照生物檢定統計法(中華人民共和國藥典2010版進行可靠性測驗及效價計算。

  質量控制:

  本品在滅菌后應澄清無沉淀,下列菌株接種后35~37℃培養14~16h生長情況如下表:

  貯 存:貯存于避光、陰涼干燥處,用后立即旋緊瓶蓋。貯存期三年。

  規 格:250g

  參考文獻:

 

  1. 《中華人民共和國藥典》2010年版,附錄XI A 抗生素微生物鑒定法。


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