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廣東環(huán)凱生物科技有限公司
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028381卵黃多粘菌素瓊脂平板(MYP)(MannitolYolkPolymyxinAgarplate)用途:卵黃多粘菌素瓊脂平板用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測(cè)定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64,GB/T4789.14-2003,SN0176-92和SN/T2206.2-2009,ISO標(biāo)準(zhǔn))
028381 卵黃多粘菌素瓊脂平板(MYP)
(Mannitol Yolk Polymyxin Agar plate)
用 途:
卵黃多粘菌素瓊脂平板用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測(cè)定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64,GB/T4789.14-2003,SN0176-92和SN/T2206.2-2009,ISO標(biāo)準(zhǔn))。
原 理:
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素和生長因子;D—為可發(fā)酵糖類;氯化鈉維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養(yǎng)基的凝固劑;酚紅為pH指示劑;卵黃含有,蠟樣芽孢桿菌產(chǎn)生酶,在菌落周圍產(chǎn)生沉淀環(huán);并發(fā)酵D—產(chǎn)酸使菌落顯黃色;可抑制雜菌的生長。
培養(yǎng)基配方(每升):
蛋白胨 10g
牛肉膏粉 1g
D— 10g
氯化鈉 10g
瓊脂 15g
酚紅 0.025g
最終pH7.4±0.2
使用方法: (平板計(jì)數(shù)法)
1、樣品的制備。
以無菌操作將檢樣25g(mL)用滅菌生理鹽水或磷酸鹽緩沖液做成10-1—10-5的稀釋液。
2、取各稀釋液0.1mL接種到MYP瓊脂平板上,用滅菌L形玻璃棒均勻涂布于整個(gè)瓊脂表面。每稀釋度接種兩個(gè)MYP瓊脂平板。
3、將平板置于36±1℃培養(yǎng)12-20h。
4、選取適當(dāng)菌落的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)。并計(jì)算同一稀釋度兩個(gè)平板的平均菌落數(shù)。
蠟樣芽孢桿菌在MYP平板上生成的菌落為粉紅色,環(huán)繞產(chǎn)生酶沉淀環(huán)。如反應(yīng)不典型,可繼續(xù)培養(yǎng)24h再計(jì)數(shù)。
5、計(jì)數(shù)后從每個(gè)平板上選取5個(gè)已計(jì)數(shù)的菌落,按有關(guān)操作進(jìn)行證實(shí)實(shí)驗(yàn)。
6、根據(jù)證實(shí)實(shí)驗(yàn)確定為蠟樣芽孢桿菌的菌落數(shù),按比例計(jì)算出該皿內(nèi)的蠟樣芽孢桿菌菌落數(shù),然后乘其稀釋倍數(shù),即得每克(或mL)樣品所含蠟樣芽孢桿菌數(shù)。例如MYP平板的可疑菌落為25個(gè),取5個(gè)鑒定,證實(shí)為4個(gè),乘上稀釋倍數(shù)(如10-4),再乘上1 g(或mL)檢樣數(shù)(取的是0.1mL樣)則為:
25×4/5×10-4×10=2×106
質(zhì)量控制:
質(zhì)控菌株接種后于36±1℃培養(yǎng)24h,結(jié)果如下。
貯 存:貯存于4-8℃。貯存期三個(gè)月。
規(guī) 格:20個(gè)/盒
參考文獻(xiàn):
1. GB/T 4789.14-2003 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 蠟樣芽孢桿菌
2. GB/T 4789.28-2003 中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn) 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn) 染色法,培養(yǎng)基和試劑
3. SN 0176-92 中華人民共和國進(jìn)出口商品檢驗(yàn)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 出口食品中蠟樣芽孢桿菌檢驗(yàn)方法
4. SN/T2206.2-2009 中華人民共和國出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn) 化妝品微生物檢驗(yàn)方法 第2部分:需氧芽孢桿菌和蠟樣芽孢桿菌
5. ISO7932:2004 Microbiology of food and animal feeding stuffs-----Horizontal method for the enumeration of presumptive Bacillus cereus-----Colony-count technique at 30℃
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