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022020營養瓊脂(普通斜面培養基)(NutrientAgar)用途:營養瓊脂(普通肉湯瓊脂培養基)用于細菌總數測定、保存菌種及純培養,也可用于消毒效果測定(GB/T4789.28-2003中4.7,GB/T4789.2-2003,GB15979-2002和GB15981-1995,ISO標準)
022020營養瓊脂(普通斜面培養基)
(Nutrient Agar)
用 途:
營養瓊脂(普通肉湯瓊脂培養基)用于細菌總數測定、保存菌種及純培養,也可用于消毒效果測定(GB/T4789.28-2003 中4.7 ,GB/T4789.2-2003,GB15979-2002和GB15981-1995,ISO標準)。
【檢驗原理】
蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、維生素、氨基酸和碳源;氯化鈉能維持均衡的滲透壓;瓊脂是培養基的凝固劑。
【配方成分】
配方(每升) 含量
蛋白胨 10g
牛肉膏粉 3g
氯化鈉 5g
瓊脂 15g
最終pH 7.3±0.2
【使用方法】
1、稱取本品33g,加入蒸餾水或去離子水1 L,攪拌加熱煮沸至*溶解,分裝三角瓶,121℃高壓滅菌15min,備用。
2、(食品)以無菌操作稱取檢樣25克(或25mL),放入含有225mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的玻璃三角瓶中(瓶內預置適當數量的玻璃珠),充分振搖,即為1:10的均勻稀釋液。依次做1:100,1:1000……稀釋液。
3、根據對樣品污染情況的估計,選擇2—3個合適的稀釋度,分別在做10倍稀釋的同時,吸取1mL稀釋液于滅菌平皿中,每個稀釋度做2個平皿。
4、稀釋液移入平皿后應及時將涼至46℃左右的培養基注入平皿約15mL,并轉動平皿使混合均勻,同時將營養瓊脂培養基傾入加有1mL稀釋液的滅菌平皿內作空白對照。待瓊脂凝固后,倒置于36±1℃溫箱中培養48±2h。
5、觀察結果。
6、菌落計數方法:
做平板菌落計數時,可用肉眼觀察,必要時用放大鏡檢查,以防遺漏,在計下各平板的菌落數后,求出同稀釋度的各平板平均菌落總數。
7、菌落計數的報告:
選取菌落數在30—300之間的平板作為菌落總數測定標準。一個稀釋度使用兩個平板,應采用兩個平板平均數,其中一個平板有較大片狀菌落生長時,則不宜采用,而應以無片狀菌落生長的平板作為該稀釋度的菌落數,若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布又很均勻,即可計算半個平板后乘以2以代表全皿菌落數。平皿內如有我鏈狀菌落生長時(菌落之間無明顯界線),若僅有一條鏈,可視為一個菌落;如有不同來源的幾條鏈,則應將每條鏈視為一個菌落計
A:稀釋度的選擇:
應選擇平均菌落數在30—300之間的稀釋度,乘以稀釋倍數報告之(見附表)。
若有兩個稀釋度.其生長的菌落數無均在30—300之間,則視兩者之比如何來決定。若其比值小于或等于2,則應報告其平均數;若大于2則報告其較小的數字(見表中例2及3)。
若所有稀釋度的平均菌落數均大于300則應按稀釋度的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表中例4)。
若所有稀釋度的平均菌落數均小于30,則應按稀釋度的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表中例5)。
若所有稀釋度均無菌落生長,則以小于1乘以稀釋倍數報告之(見表中例6)。
若有稀釋度的平均菌菌落數均不在30—300之間,其中一部分大于300或小于30時,則以30或300的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表中例7)。
菌落數的報告:
菌落數在100以內時,按其實有數報告,大于100時,采用二位有效數字,在二位數字后面的有效數值,以四舍五入法計算。為了縮短數字后面的零數,也可以用10的指數來表示(見表中“報告方式欄")。
【質量控制】
1. 外觀方面
淡黃色顆粒,高壓滅菌后呈淡黃色透明無沉淀,傾注平皿冷卻后呈淡黃色凝膠。
2. 生物學方面
下列質控菌株接種待測試培養基,36℃±1℃培養18~24h,結果如下:
【儲存條件及保質期】
貯存于避光、陰涼干燥處;貯存期三年。
【注意事項】
1、稱量時注意粉塵,佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系統不適。
2、自制平板時需注意培養基的厚度,厚度過薄容易造成瓊脂水分保持性下降,開裂;因此,一般需要15-20mL(Φ90mm)體積培養基,平板培養基厚度至少為2mm。
3、質檢報告可以登錄環凱網站,打開“客服中心"頁面,輸入產品批號下載。
【廢物處理】
檢測之后帶菌平板置于121℃下高壓滅菌30分鐘后處理。
【執行標準】
Q/HKSJ 03 普通微生物培養基
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