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071820單核增生性李斯特氏菌生化鑒定盒(10種×10支)一)整套試劑及用品鑒定生化反應的10種試劑(表1)、10瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶1McFarland的濁度管、10支一次性吸管
071820 單核增生性李斯特氏菌生化鑒定盒(10種×10支)
一)整套試劑及用品
鑒定生化反應的10種試劑(表1)、10瓶0.85%無菌生理鹽水、1瓶1 McFarland的濁度管、10支一次性吸管。
二)生化管的使用方法
開啟西林瓶前,用75%酒精棉消毒西林瓶表面,在無菌條件下,按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋,撕開鋁蓋,打開西林瓶膠塞(如圖1)。所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
三)單核增生李斯特氏菌生化鑒定盒的詳細使用方法
挑取選擇性培養基上的可疑菌落接種木糖、鼠李糖發酵管36±
純培養物供染色鏡檢和生化試驗.
染色鏡檢:將上述純培養物做革蘭氏染色并做濕片檢查;李斯特氏菌為革蘭氏陽性小桿菌,大小為0.4~0.5µm×0.5~2.0µm;用生理鹽水制成菌懸液,在油鏡或相差顯微鏡下觀察,該菌出現輕微旋轉或翻滾樣的運動.
過氧化氫酶試驗:挑取TSA-YE平板上的菌落于潔凈載玻片上,滴加1滴3%的過氧化氫(H2O2)溶液,李斯特氏菌呈過氧化氫酶陽性反應。
將上述可疑菌新鮮菌苔置于已配備的無菌生理鹽水中,與1 McFarland的濁度管比濁,將菌懸液制備成1McFarland (約3.0×108cfu/mL ),用吸管吸取2滴(約0.06mL)菌懸液加入每種微量生化管內。將已接種的西林瓶再套上膠塞,一般采用全加塞(如圖2左兩瓶所示),特殊情況在下表注明采用半加塞(如圖2右兩瓶所示),直立于內托的凹槽內(如圖2),或放置于合適的瓶架中,于35-
注意:如有特殊的接種方式、培養時間或培養方式,請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
圖1 西林瓶開啟圖 圖2 西林瓶放置培養圖
四)單核細胞增生李斯特氏菌的主要生化特性及有關菌的區別見表2。(只供參考)
表2 單核細胞增生李斯特氏菌生化性狀與有關菌的區別
菌種
|
溶血反應
|
動力試驗
|
葡萄糖
|
麥芽糖
|
MR-VP
|
|
鼠李糖
|
木糖
|
七葉苷
|
單核細胞增生李斯特氏菌
L.monocytogenes
|
+
|
+
|
+
|
+
|
+/+
|
-
|
+
|
-
|
+
|
格氏李斯特氏菌
L.grayi
|
-
|
+
|
+
|
+
|
+/+
|
+
|
_
|
-
|
+
|
斯氏李斯特氏菌
L.seeligeri
|
+
|
+
|
+
|
+
|
+/+
|
-
|
-
|
+
|
+
|
威氏李斯特氏菌
L.welshimeri
|
-
|
+
|
+
|
+
|
+/+
|
-
|
V
|
+
|
+
|
伊氏李斯特氏菌
L.ivanovii
|
+
|
+
|
+
|
+
|
+/+
|
-
|
-
|
+
|
+
|
英諾克李斯特氏菌
L.innocua
|
-
|
-
|
+
|
+
|
+/+
|
-
|
V
|
-
|
+
|
注: “+" 陽性;“-" 陰性; “V" 反應不定
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