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上海酶聯(lián)生物研究所
上海酶聯(lián)生物研究所
閱讀：289發(fā)布時間：2012-11-5
在甲基化分析中，亞硫酸氫鹽轉化通常是必經之路。它將未甲基化的胞嘧啶轉化成*，而甲基化的胞嘧啶保持不變，之后再結合PCR、測序等技術分析甲基化狀態(tài)。聽上去似乎很簡單，但要想獲得漂亮的結果，卻并非那么容易。轉化效率如何？回收率如何？這都是需要考量和優(yōu)化的因素。zui近，QIAGEN推出了一款新產品EpiTect Methyl II PCR Array System，無需亞硫酸氫鹽轉化，即可快速準確地檢測單個基因或一組基因的DNA甲基化狀態(tài)。
EpiTect Methyl II PCR Array System采用創(chuàng)新的MethylScreen技術，實現(xiàn)了單個基因以及疾病和通路聚焦的一組基因中CpG島DNA甲基化的快速準確檢測。此技術無需亞硫酸氫鹽轉化。通過一步簡單的限制性內切酶消化以及實時定量PCR，22個或94個不同基因的DNA甲基化水平可利用DNA Methylation PCR Array同時分析。MethylScreen技術是由Orion Genomics公司在2007年開發(fā)的。1這種方法是基于甲基化敏感（MSRE）和/或甲基化依賴（MDRE）的限制性內切酶切割后的DNA檢測。這兩種酶分別消化未甲基化和甲基化的DNA。消化之后，通過實時定量PCR定量每個酶切反應中剩余的DNA。利用ΔCt法將每個消化產物與mock（未添加酶）對照比較，從而確定甲基化和未甲基化DNA的相對量。操作過程的簡單讓此技術高度適合DNA甲基化圖譜分析以及多個領域的生物標志物發(fā)現(xiàn)，如干細胞分化和發(fā)育。
商鋪：http://www.kindlingtouch.com/st32881/
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