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新單色多重qPCR技術有助于疾病研究

閱讀:556發布時間:2012-10-15

                 2009年,美國猶他州大學的Richard Cawthon教授代領的研究團隊開發了一種新的單色多重qPCR技術(monochrome multiplex qPCR),他們將這一技術的具體研究成果發表在了Nucleic Acids Research 上.在這篇文章中,研究人員使用了一種單熒光DNA插入染料來測定端粒長度.qPCR分析測定一組反應孔中DNA樣品的端粒(T)信號和單拷貝基因(S)信號.與內參DNA比較,得出相對的T/S比值,這個比值與端粒的平均長度成正比.由于移液過程中DNA量的差異不會改變T/S,因此可實現多重分析.在S信號超過基線之前收集每個循環的T信號,之后在端粒樣品的*熔解溫度下收集S信號.研究人員希望通過對端粒長度的測量來探究它與疾病之間的關聯.
   

            之后,Richard Cawthon教授與美國國立癌癥研究院的Qing Lan等合作研究了外周血白細胞中DNA的端粒長度是否能作為非霍奇金淋巴瘤的預測指標.他們同樣利用該多重qPCR技術比較了107名非霍奇金淋巴瘤男性患者及對照組中白細胞DNA的端粒長度,并發現:端粒長度與該疾病的發生有關,更長的端粒長度可導致患非霍奇金淋巴瘤的風險增加.
   

               zui近,這一單色多重qPCR技術又被用于了端粒與肺癌相關性的研究.科研人員比較了229個肺癌病例及相應對照中白細胞DNA的端粒長度.結果同樣顯示:端粒長度也與肺癌的發生有關,更長的端粒長度增加了男性吸煙者患肺癌的風險.

 


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