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上海酶聯生物研究所
上海酶聯生物研究所
閱讀：1436發布時間：2010-3-30
1 ELISA技術的發展趨勢
酶聯免疫吸附試驗（ELISA）在醫院實驗室中應用之廣泛是其它試驗*的。它是一項基本的，常規的，也是一項成熟的檢測技術。90年代以來，隨意免疫熒光法，化學發光法，電化學發光法的等應用，特別是以PCR（聚合酶鏈反應）技術為代表的分子生物學水平技術的應用，人們紛紛預測；ELISA技術將被更高，更靈敏的試驗方法所取代。但是由于免疫標志物（抗原/抗體）具有無法替代的臨床意義，以及ELISA技術具有操作簡便，技術可靠，試劑方便易得等優點，特別是90年代以來ELISA技術的靈敏度和特異性都得到了顯著的提高與完善。由此，ELISA技術得到了人們的認可，成為傳染病學（肝炎，HIV，TORCH等），腫瘤標志物以及內分泌等各種臨床免疫指標檢測的不可替代的主導技術。
2 ELISA全過程自動化的意義
隨著實驗室從化驗 檢驗 醫學檢驗 檢驗醫學的發展，酶免檢驗已成為醫學領域中一門重要的學科，參與臨床診斷，治療及療效判斷等工作。*，ELISA過程具有反應時間長而要求嚴格，步驟多而復雜。因此，就一項具體的酶免試驗而言其試驗過程與完成時間是不可改變和縮短的。但對于多項目的批量標本處理時，總體的試驗時間將大大縮短。據報道（美國臨床病理學院的調查報告），實驗室誤差產生原因79%的因素是因為實驗過程中標本處理不當以及人的為的因素而造成的。所以酶免試驗全過程的意義不僅僅在于降低了實驗者的勞動強度使人們從“機械”的實驗中解放出來，而且根據已發表的文獻研究報告：全自動酶免分析系統可以普遍地，顯著地提高酶免實驗的特異性及試劑的靈敏度，降低了人為因素造成的誤差。為了提高實驗室檢驗質量，更好的為病人服務，承擔更多的檢驗項目更復雜的標本來源與實時工作模式，酶免實驗室的自動化與標準化已成為全面實驗室自動化發展的需求，同時也給實驗室帶來了新的優勢和利益。
3 全自動酶免分析儀（ALISEI）的應用評價
3.1 靈敏度的試驗評價系列濃度HbsAg定值血清，其測定值如下
| 濃度（ng/ml） | 0.125 | 0.25 | 0.50 | 1.00 | 2.00 |
| 吸光度（S） | 0.078 | 0.093 | 0.200 | 0.351 | 0.747 |
| S/CO | 0.52 | 0.88 | 1.90 | 3.34 | 7.11 |
CO=0.05×2.1=0.105.既當S/CO>=1時為陽性。結果表明：全自動酶免分析儀具有較高的檢測靈敏度。當HbsAg的濃度在0.5ng/ml時即可檢出。
3.2 重復性的試驗評價取混合HBsAg定值血清和HbsAg陽性患者血清作20次連續檢測，其結果如
NO 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
定值血清 0.490 0.530 0.491 0.509 0.459 0.537 0.490 0.484 0.475 0.486
陽性血清 2.595 3.065 2.965 2.891 2.888 2.864 2.865 2.915 3.080 2.923
NO 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20
定值血清 0.477 0.484 0.492 0.553 0.463 0.486 0.517 0.494 0.488 0.476
陽性血清 2.984 2.875 3.012 2.878 2.932 3.020 2.884 2.860 2.879 2.967
定值血清： X=0.493 SD=0.022 CV=1.085%
陽性血清： X=2.94 SD=0.068 CV=1.999%
結果表明：全自動酶免分析儀具有良好的重復性，符產品的要求（CV<3%）。
3.3 討論
ELISA試驗受諸多因素影響。其中試劑盒的質量以及操作者的水平將直接影響到這一過程的成功與否。因此在*按照試劑盒要求的前提下，均一，穩定的操作過程和試驗條件是獲得*試驗結果的必要條件。而全自動酶免分析儀避免了常規程序的局限性，集加樣，孵育，洗板，比色于一體。極大的消除了人為因素帶來的誤差，使試驗的靈敏性，重復性以及特異性同時有所提高。所以，全自動酶免分析儀符合現代化實驗室的要求，也是現代化醫院實驗室的發展趨勢。
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