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上海酶聯(lián)生物研究所


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所在地區(qū):上海上海市

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技術(shù)文章

96T人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1的試驗步驟

閱讀:252發(fā)布時間:2012-9-20

上海工碩生物技術(shù)有限公司專業(yè)供應(yīng)各種屬ELISA試劑盒,金標(biāo)試劑盒,細(xì)胞株,抗體,生物試劑,生物耗材,食品檢測試劑盒,放免試劑盒,胎牛血清,提供免費代測服務(wù),保證實驗結(jié)果客觀真實性。我公司對試劑盒質(zhì)量100%保證,若存在質(zhì)量問題,我們無條件包退換。若需要了解試劑盒的詳細(xì)信息,請聯(lián)系人:王   021-57688126

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1的試驗步驟

注意事項
1.  此試劑為體外檢測試劑,效期內(nèi)使用,試劑應(yīng)視為傳染物,不同總批號的試劑不能混用。
使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出。室溫放置至少30分鐘,
濃縮洗滌液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘。
濃縮樣品稀釋液出現(xiàn)結(jié)晶后,請于37℃孵育15分鐘
若24小時內(nèi)進(jìn)行實驗,標(biāo)本可存放于2~8℃。不需及時實驗,標(biāo)本-20℃保存,避免反復(fù)凍融。
在反復(fù)清洗微孔板,并扣干微孔中的殘余液體,否則將降低度,造成吸光度偏離的假像。
加樣完畢后,應(yīng)注意輕微搖動微孔反應(yīng)條,以便使孔中的液體充分混勻。
試劑盒保存于2~8℃,請勿冷凍,有效期請見盒內(nèi)標(biāo)示。

實驗前準(zhǔn)備
1.使用前應(yīng)將盒內(nèi)各試劑取出,室溫放置至少30分鐘。
2.準(zhǔn)備各種實驗儀器及材料,如微量移液器,吸頭,醫(yī)用蒸餾水等
3.濃縮洗液與醫(yī)用蒸餾水1︰19倍稀釋后成為應(yīng)用洗滌液
4.濃縮樣品稀釋液與醫(yī)用蒸餾水1︰4倍稀釋成應(yīng)用樣品稀釋液
5.用應(yīng)用樣品稀釋液來稀釋樣品,按照1:100的體積比來稀釋樣品如10μl的樣品加入到1ml的應(yīng)用樣品稀釋液中,充分混勻待用。)

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1的試驗步驟
 

操 作 步 驟
1.取出酶標(biāo)板,設(shè)空白孔,依照次序?qū)?yīng)分別加入100μl的標(biāo)準(zhǔn)品于空白微孔中(空白孔視為0號標(biāo)準(zhǔn)品,用醫(yī)用蒸餾水替代)
2、分別標(biāo)記樣品編號,加入100μl的稀釋樣品于空白微孔中(不同的樣本采用不同的吸頭)。
3、將酶標(biāo)板置于37℃溫育30分鐘;
4、將酶標(biāo)板板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體;
5、每個孔中加滿應(yīng)用洗滌液后,輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
6、重復(fù)第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
7、在標(biāo)準(zhǔn)品孔和樣品孔中加入100μl的酶標(biāo)偶合溶液。
8、將96孔板置于37℃溫育30分鐘。
9、將酶標(biāo)板取出,將其中的液體甩去,每個孔中全部加滿應(yīng)用洗滌液后,立即甩去液體。
10、每個孔中再次加滿洗滌應(yīng)用液后,室溫輕微振搖酶標(biāo)板30秒后將孔中的應(yīng)用洗滌液甩去,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
11、重復(fù)第5個步驟5次,在吸水紙上將酶標(biāo)板拍干。
12、在每個孔中加入底物A 50μl后立即加入底物B 50μl。輕輕振蕩混勻。(A液、B液采用不同的吸頭加樣)
13、將酶標(biāo)板置于37℃避光溫育反應(yīng)15分鐘。
14、每個微孔中加入50μl的終止液,輕輕振蕩混勻。
15、在酶標(biāo)儀上,450nm處測定OD; 顯色后,15分鐘內(nèi)進(jìn)行測定。
16、根據(jù)制備的標(biāo)準(zhǔn)曲線,計算樣本含量

人基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子-1的試驗步驟
 

結(jié) 果 判 斷
 1. 儀器值:于波長450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值;
 2、檢測值范圍:0-800pg/ml
 3、敏感度:1.0pg/ml
Cobal sulfate, heptahydrate 硫酸鈷 七水 [10026-24-1] 250g
Coenzyme A, free acid, hydrate (COA) 輔酶 A [85-61-0] 100mg
Coenzyme Q10 * [303-98-0] 250mg
Coenzyme Q10 * [303-98-0] 1g
Colchicine 秋水仙素; * [64-86-8] 100mg
Safranin O 番紅O [477-73-6] 100g
Collagen, Type I >500 U/mg 膠原(蛋白) [9007-34-5] 10g
Isocitrate dehydrogenase 異檸檬酸脫氫酶 / 3000U
Lecithin 大豆* [8002-43-5] 250g
Levetiracetam * [102767-28-2] 100g
Luminol 魯米諾 [521-31-3] 5g
Methotrexate disodium salt 甲氨喋呤二鈉鹽 [7413-34-5] 1g
4-Methoxysalicylaldehyde 4-甲氧基水楊醛 [673-22-3] 25g
Myokinase from Yeast 肌激酶 [9013-02-9] 2KU
NAD trihydrate 氧化型輔酶 I [53-84-9] 5g
NADP 氧化型輔酶 II [24292-60-2] 250mg
2-Naphthalene methanol 2-萘甲醇 [1592-38-7] 25g
 


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