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技術文章

48T人乳頭狀瘤病毒抗體IgGELISA 檢測試劑盒

閱讀:332發布時間:2012-8-2

人乳頭狀瘤病毒抗體IgGELISA 檢測試劑盒            

本試劑僅供研究使用  標本:血清或血漿

試驗原理:
    HPV-IgG試劑盒是固相夾心法酶聯免疫吸附實驗(ELISA).已知HPV-IgG濃度的標準品、未知濃度的樣品加入微孔酶標板內進行檢測。先將HPV-IgG和*標記的抗體同時溫育。洗滌后,加入親和素標記過的HRP。再經過溫育和洗滌,去除未結合的酶結合物,然后加入底物A、B,和酶結合物同時作用。產生顏色。顏色的深淺和樣品中HPV-IgG的濃度呈比例關系。

自備材料
蒸餾水。
加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。
振蕩器及磁力攪拌器等。

安全性
避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

人乳頭狀瘤病毒抗體IgGELISA 檢測試劑盒

操作注意事項
試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
底物A應揮發,避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。

樣品收集、處理及保存方法
血清-----操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
細胞上清液---1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
組織勻漿-----將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液
保存------如果樣品不立即使用,應將其分成小部分-70 ℃保存,避免反復冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測前先離心或過濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。

洗滌緩沖液(50×)的稀釋:蒸餾水50倍稀釋。

人乳頭狀瘤病毒抗體IgGELISA 檢測試劑盒

操作步驟
使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產生大量的泡沫,以免加樣時加入大量的氣泡,產生加樣上的誤差。
根據待測樣品數量加上標準品的數量決定所需的板條數。每個標準品和空白孔建議做復孔。每個樣品根據自己的數量來定,能使用復孔的盡量做復孔。標本用標本稀釋液1:1稀釋后加入50ul于反應孔內。
加入稀釋好后的標準品50ul于反應孔、加入待測樣品50ul于反應孔內。立即加入50ul的*標記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
甩去孔內液體,每孔加滿洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復此操作3次。如果用洗板機洗滌,洗滌次數增加一次。
每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
取出酶標板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應立即測定結果。
在450nm波長處測定各孔的OD值。

6號標準品以上的結果為非線性的,根據此標準曲線無法得到的結果。

試劑盒性能
1. 靈敏度:zui小的檢測濃度小于1號標準品。稀釋度的線性。樣品線性回歸與預期濃度相關系數R值為0.990。
2. 特異性:不與人其它細胞因子反應。
3. 重復性:板內、板間變異系數均小于10%。

人乳頭狀瘤病毒抗體IgGELISA 檢測試劑盒

結 果 判 斷 與 分 析
1、儀器值:于波長450nm的酶標儀上讀取各孔的OD值

2、以吸光度OD值為縱坐標(Y),相應的HPV-IgG標準品濃度為橫坐標(X),做得相應的曲線,樣品的HPV-IgG含量可根據其OD值由標準曲線換算出濃度。

3、檢測值范圍:0-80IU/L

4、敏感度: 0.1 IU/L

p-Hydroxybenzoic acid methyl ester 尼泊金甲酯 [99-76-3] 100g
p-Hydroxybenzoic acid methyl ester sodium salt 尼泊金甲酯鈉 [5026-26-0] 250g
p-Hydroxybenzoic acid propyl este 尼泊金丙酯 [94-13-3] 250g
p-Hydroxybenzoic acid propyl ester sodium salt 尼泊金丙酯鈉 [35285-69-9] 250g
1-Hydroxybenzotriazole monohydrate 對羥基苯三唑一水 [2592-95-2] 50g
1-Hydroxybenzotriazole monohydrate 對羥基苯三唑一水 [2592-95-2] 250g
4-Hydroxycarbazole 4-羥基咔唑 [52602-39-8] 25g
3-Hydroxycinnamic acid 間羥基肉桂酸 [14755-02-3] 25g
trans-4-Hydroxycinnamic acid 4-羥基肉桂酸 [501-98-4] 250g
4-Hydroxycoumarin 4-羥基香豆素 [1076-38-6] 250g
7-Hydroxycoumarin 7-羥基香豆素 [93-35-6] 50g
Hydroxyethyl Cellulose 低粘度羥乙基纖維素 [9004-62-0] 250g
Hydroxyethyl Cellulose 低粘度羥乙基纖維素 [9004-62-0] 1kg
Hydroxyethyl Cellulose 中粘度羥乙基纖維素 [9004-62-0] 250g
Hydroxyethyl Cellulose 中粘度羥乙基纖維素 [9004-62-0] 1kg
Insect moulting hormone 蛻皮激素 [5289-74-7] 10g
INT dye 碘硝基四唑紫 [146-68-9] 1g
INT dye 碘硝基四唑紫 [146-68-9] 5g
Hydroxyethyl Cellulose 高粘度羥乙基纖維素 [9004-62-0] 250g
Hydroxyethyl Cellulose 高粘度羥乙基纖維素 [9004-62-0] 1kg
Hydroxyethyl Cellulose 高粘度羥乙基纖維素 [9004-62-0] 100g
Hydroxyethyl Cellulose 高粘度羥乙基纖維素 [9004-62-0] 500g
Hydroxyectoine 5-羥基-2甲基-1,4,5,6-四氫嘧啶4甲酸 [165542-15-4] 1g
Hydroxyectoine 5-羥基-2甲基-1,4,5,6-四氫嘧啶4甲酸 [165542-15-4] 5g
Hydroxylamine hydrochloride 鹽酸羥胺 [5470-11-1] 100g
Hydroxylamine hydrochloride 鹽酸羥胺 [5470-11-1] 500g
Hydroxylamine sulfate 酸羥胺 [10039-54-0] 100g
Hydroxylamine sulfate 酸羥胺 [10039-54-0] 500g
3-Hydroxy-methylbenzoic acid 3-羥基-4-甲基苯甲酸 [586-30-1] 25g
7-Hydroxy-4-methylcoumarin 7-羥基-4-甲基香豆素 [90-33-5] 100g
N-(Hydroxymethyl)phthalimide N-羥甲基鄰苯二甲酰亞胺 [118-29-6] 250g
2-Hydroxyphenylacetic acid 2-羥基苯乙酸 [614-75-5] 100g
4-Hydroxyphenylacetic acid 4-羥基苯乙酸 [156-38-7] 100g
2-(4-Hydroxyphenyl) ethanol 對羥基苯乙醇 [501-94-0] 50g
N-Hydroxyphthalimide N-羥基鄰苯二甲酰亞胺 [524-38-9] 250g
3-Hydroxypicolinic acid 3-羥基-2-吡啶甲酸 [874-24-8] 25g
6-Hydroxypicolinic acid 6-羥基-2-吡啶甲酸 [19621-92-2] 25g
L-Hydroxyproline 反式-4-羥基-L-* [51-35-4] 25g
L-Hydroxyproline 反式-4-羥基-L-* [51-35-4] 100g
Hydroxypropyl-β-cyclodextrin 羥丙基-β-環糊精 [128446-35-5] 1g
Hydroxypropyl-β-cyclodextrin 羥丙基-β-環糊精 [128446-35-5] 5g
Hydroxypropyl cellulose 低粘度羥丙基纖維素 [9004-64-2] 250g
Hydroxypropyl cellulose 低粘度羥丙基纖維素 [9004-64-2] 1kg


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