江蘇/北京 液相色譜儀的分析方法優(yōu)化剖析:
1.要求標(biāo)準(zhǔn):
確保分析系統(tǒng)的所有的分離組分達(dá)到規(guī)定要求(保證組分的重復(fù)性),在此基礎(chǔ)上盡量縮短分析時(shí)間;
2.尊重原分析方法,用標(biāo)準(zhǔn)品測試分析方法;
3.用溶解樣品的溶劑做空白,確定溶劑峰在色譜圖上的出峰時(shí)間;
4.用配好的一定濃度的標(biāo)準(zhǔn)品進(jìn)針,確定標(biāo)準(zhǔn)品峰在色譜圖上的出峰時(shí)間。
a.如果標(biāo)準(zhǔn)品峰與溶劑峰重疊或者分離不好,則要調(diào)整流動(dòng)相(例如,反相色譜系統(tǒng)需要增加水和緩沖液的比例,減少有機(jī)溶液的比例)或者選用長一些的色譜柱。
b.如果標(biāo)準(zhǔn)品峰在進(jìn)針后很長時(shí)間沒有出峰,就需要耐心等待出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)品峰,只有出現(xiàn)標(biāo)準(zhǔn)品峰,才有可能去調(diào)整流動(dòng)相(例如,反相色譜系統(tǒng)需要減少水和緩沖液的比例,增加有機(jī)溶液的比例)或者選用短一些的色譜柱。
5.對一些黏度比較大的流動(dòng)相,則需要加裝色譜柱柱溫箱,以提高色
譜柱的溫度,降低流動(dòng)相的黏度,縮短保留時(shí)間。
6.如何降低梯度分析的基線噪聲
大家都知道在做等度分析中流動(dòng)相是配好平衡好的,基線噪聲很小。而梯度分析則是水及水的緩沖液相與有機(jī)相在動(dòng)態(tài)狀態(tài)下進(jìn)行混合和平衡的,再加上恒流泵的脈動(dòng)因素使其基線噪聲增大。從而降低了儀器的靈敏度。
以二元高壓梯度為例:
將A泵以甲醇為流動(dòng)相從90%變化到70%,B泵以水為流動(dòng)相從10%變化到30%,進(jìn)行梯度分析。改變?yōu)榕涑?0%甲醇水溶液和70%甲醇水溶液,分別用A泵輸送90%甲醇水溶液,用B泵輸送70%甲醇水溶液,進(jìn)行梯度分析。這樣的混合方式可有效地降低基線噪聲。