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液相色譜分析中峰位置改變的原因與解決辦法

閱讀:44發布時間:2022-9-25

  液相色譜分析中峰位置的改變是保留時間改變的特殊情況。但是峰位置的變化比色譜圖中每個峰的保留時間增加或減少更為嚴重。因為保留時間的改變,可用改變流動相的強度或改變流速保持原來的水平,如果色譜圖中峰位順序發生變化,或是原先分開的峰又交叉在一起,無論采用什么方法處理都不那么簡單。引起峰位順序的變化可能有以下兩種原因。

  1 柱退化

  同一根柱因鍵合相的組成發生了變化(化學垃圾或鍵合相損失),導致峰位置的改變。

  2 -柱間的變化

  發了峰位置的改變,首先檢查分離條件有無差錯(流動相、溫度、柱等),一旦確認了分離條件是正確的,可能面臨更困難的問題,直至需要重新建立色譜方法。

  在初建色譜方法時就能預測到峰的位置。通常要系統地改變條件,使所有的組分的峰在色譜圖內處于位置。如反相分離電離組分時,可改變溶劑,也可改變pH值或緩沖液濃度,或加改良劑。改變這些條件時可以注意到峰位置的變化。

  在試驗的過程中要謹慎行事,只要恢復到可接受的峰位就可。特別在多組分的分離中,如氨基酸的分析,要有合適的分離條件使所有的峰都有確定的位置,稍有不慎,某些組分就會分不開。所幸的是只要做一些條件的變化,就可能找到的位置。


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