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技術(shù)文章

膠體金免疫層析技術(shù)

閱讀:543發(fā)布時間:2011-7-23

膠體金免疫層析(GICA)技術(shù)是20世紀(jì)90年代初在免疫滲濾技術(shù)基礎(chǔ)上建立的一種簡易快速的免疫學(xué)檢測技術(shù),由Beggs等zui先用于人絨毛膜*(HCG)的測定。GICA是以NC膜為載體,利用微孔膜的毛細(xì)管作用,使滴加在膜條一端的液體慢慢向另一端滲移,如同層析一般。

免疫金復(fù)合物干片粘連在近NC膜條下端(c),膜條測試區(qū)(t)包有特異抗體,當(dāng)試紙條下端進(jìn)入液體標(biāo)本樣中,下端吸水材料吸取液體向上端移動,流經(jīng)c處時,使干片上的免疫金復(fù)合物復(fù)溶,并帶動其向膜條滲移,若標(biāo)本有特異性抗原時,可與免疫金復(fù)合物的抗體結(jié)合,形成的金標(biāo)抗原—抗體復(fù)合物流至測試區(qū),被固相抗體所捕獲,形成抗體—抗原—金標(biāo)抗體復(fù)合物,在膜上t處出現(xiàn)紅色控制線。

GICA技術(shù)操作方便,不需要任何儀器,只需將GICA檢測條插入待測樣本即可,而且樣本基本不需做前處理(可以是組織液、血清和尿液等);檢測試紙條體積??;檢測結(jié)果易于判定,GICA檢測條的陰性、陽性反應(yīng)帶呈色很明顯,肉眼很容易判斷;而且靈敏度高可達(dá)到lng;特異性好,因?yàn)樵摍z測條大多用單克隆抗體標(biāo)記,這決定了它具有很好的特異性;速度快,一般只要5—10min。

GICA的這些特性使它在工作量大、設(shè)施較簡單的動物檢驗(yàn)檢疫實(shí)際工作中具有很大的實(shí)用性。GICA技術(shù)在動物檢驗(yàn)檢疫工作中廣泛用于諸如豬瘟、藍(lán)耳病、細(xì)小病毒病等傳染病病原微生物的抗原、抗體檢測,也可用于一些違禁和超量使用激素(如性激素)殘留的檢測。此外,該技術(shù)還可用于其他一些微量物質(zhì)的檢測,如抗生素殘留檢測等。

膠體金免疫層析(GICA)作為一種可靠的免疫學(xué)檢測技術(shù),其特異性強(qiáng)、靈敏度高、簡便快速、無需特殊儀器設(shè)備,在動物檢驗(yàn)檢疫實(shí)際工作中有廣泛的應(yīng)用價值。目前國內(nèi)已有少量獸醫(yī)用商品GICA檢測條生產(chǎn)(如瘦肉精檢測條、雞法氏囊、豬旋毛蟲和新城疫檢測條等)。如果加大研究開發(fā)力度,可望將GICA技術(shù)廣泛用于各種疾病的快速診斷和檢測,為實(shí)現(xiàn)我國動物檢驗(yàn)檢疫工作的科學(xué)化、標(biāo)準(zhǔn)化和快捷化具有重要意義。

綜上所述,免疫檢測雖然是一種比較古老的檢測方式,但與新的技術(shù)結(jié)合后,無論是靈敏度抑或是特異性都有了極大的提高,依舊是動物檢驗(yàn)檢疫領(lǐng)域中廣泛使用的檢測手段之一。當(dāng)然在實(shí)際工作中需要依靠多種檢測手段和多方面的證據(jù),單一的免疫學(xué)檢測手段有時無法提供病原學(xué)檢驗(yàn)所需的足夠信息。只有將各種生物技術(shù)結(jié)合起來,才能幫助我們及時準(zhǔn)確地對病原體進(jìn)行檢驗(yàn)、檢疫,這對于及時發(fā)現(xiàn)和控制病原可能帶來的傳播和流行具有重要意義。


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