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上海源葉生物科技有限公司
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閱讀:9430發布時間:2011-4-13
新城疫病毒強化試驗
CSFV感染豬辜丸細胞后,不能使細胞發生CPE(細胞致病變效應)變化,但將雞新城疫病毒接種于該感染細胞,則該細胞發生CPE變化。
根據CSFV的這一特性可以對CSFV進行檢測和診斷,即稱為雞新城疫病毒強化試驗(exalation of NDV,END)。此方法的不足之處是直接將被檢病料處理后接種于細胞培養物,敏感性較低。若改用兩步法,即先將被檢病料處理后接種于豬脾細胞培養物,傳代適應之后,再做END試驗,則可明顯提高其敏感性,但這樣檢測所需時間較長。該方法適用于檢測那些易在豬源細胞中生長的野毒,對大部分兔化弱毒株無效,其原因是有些病毒往往不能在豬辜丸細胞內充分繁殖。優點:該方法具有較高的敏感性和重復性。缺點:特異性差,有些弱毒株能引起END現象,且易散毒。
病毒分離與增毒試驗
CSFV能在豬腎細胞和其他一些哺乳動物細胞內增殖,敏感性zui強的細胞系是PK-巧、PK-2a和ST等幾株豬腎和豬睪丸細胞系。
豬瘟病毒CSFV的分離一般采取病死豬的脾或淋巴結等含毒較高的組織,經研磨后用0.45rmi濾膜過濾,將濾液中病毒接種于敏感細胞進行分離,在接種病毒1天、2天、3天后進行免疫酶染色或免疫熒光染色、鏡檢。病毒分離鑒定方法具有準確的優點,但此法費時費力,且CSFV在傳代過程中易發生變異,不利于對病毒核酸序列的分析。
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