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技術文章

免疫固定電泳

閱讀:1306發布時間:2011-1-19

免疫固定電泳(immunofixation electrophoresis,IFE)是在1969年Alper和Johnson推薦的一項有實用價值的電泳加沉淀反應技術。可用于各種蛋白質的鑒定。該法原理類似免疫電泳,不同之處是將血清直接加于電泳后蛋白質區帶表面,或將浸有抗血清的濾紙貼于其上,抗原與對應抗體直接發生沉淀反應,形成的復合物嵌于固相支持物中。將未結合的游離抗原或抗體洗去,則出現被結合固定的某種蛋白。區帶電泳支持物選用濾紙、醋纖膜、瓊脂或聚丙烯酰胺皆可。

免疫固定電泳zui常用于M蛋白的鑒定。方法是:先將患者血清或血漿在醋纖膜上或瓊脂上作區帶電泳(一般作6條標本),達到預定時間后取下,加抗血清,由上而下依次加抗人全血清、抗IgG、抗IgA、抗IgM、抗κ輕鏈和抗λ輕鏈。必要時還可加抗Fab、抗Fc等特殊抗血清。作用30min后洗去游離蛋白質,染色后則可見被固定的相應M蛋白成分。
 


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