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一、“豬孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒"參數規格
保存條件:2-8℃低溫保存
保質期:6個月,所有試劑盒均提供批次。
試劑盒成分:酶標板,試劑,標準品等。
二、選型
產品規格:96T/48T
96T指可以做94個標本-2個標準對照-84個樣本
48T指可以做47個標本-1個標準對照-42個樣本
三、Elisa試劑盒實驗原理
ELISA是以免疫學反應為基礎,將抗原、牽9體的特異性反應與酶對底物的高效催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。由于抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每加入一種試劑孵育后,可通過洗滌除去多余的游離反應物,從而保證試驗結果的特異性與穩定性。在實際應用中,通過不同的設計,具體的方法步驟可有多種。即:用于檢測抗體的間接法(圖a)、用于檢測抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢測小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。比較常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。
四、豬孕激素/孕酮(PROG)ELISA試劑盒優勢體現
Elisa技術在上述方面表現出如下*性:
(一)靈敏度高
雖然酶活性調節Elisa方法的靈敏度目前并不十分理想,但在酶活性放大Elisa中,檢測的靈敏度遠比RIA高。根據質量作用定律。即免疫反應所形成的免疫復合物量與反應物濃度成正比。推測所檢測的待測物分子數為1。已知1個摩爾濃度含6.02×1023個分子,那么理論推測酶活性放大Elisa方法的zui低檢測限可達1.7×10-24mol/L。雖然在實際應用中由于反應條件和試劑純度以及儀器精度等因素的影響,往往達不到這個水平(大于104個分子),但表明Elisa在靈敏度方面的改進潛力是很大的。
(二)特異性強
從免疫反應的角度來說,Elisa與RIA的特異性應該是*的。但在Elisa方法中,由于作用檢測指示劑的酶與其底物的反應有專一性,從而增加了該方法的特異性。
(三)對儀器設備要求不高,測定成本低
Elisa測定在普通實驗室便可進行,常用的儀器設備包括加樣器、培養箱、酶標讀數器等。按現有價格折算,酶標儀的價格只及液閃儀的1/6至1/4,因此每測定一個樣本所需成本不及PIA的1/10至1/16。某些定性Elisa方法,還可在野外進行,操作十分方便。
(四)方法快速、簡便
均質酶免疫測定方法操作時,所有反應試劑均在同一體系內進行,不需任何分離步驟,操作十分簡便、快速,數分鐘便能得出結果。某些定性Elisa試劑盒,如國外生產的某些奶牛發情鑒定和妊娠診斷Elisa試劑盒,數分鐘時間便能完成一次測定。
(五)試劑保存時間較長
作為檢測指示劑用的酶和酶標記物,在低溫或干燥條件下相對穩定,可保存半年至數年之久。
(六)自動化程度高
Elisa由于不存在放射性同位素污染,因此,除加待測樣本需要人工操作外,其他各步驟均可用儀器自動化完成。在這種自動化條件下,平均每人每天可完成2000余個樣本的檢測工作。
(七)方法種類多
Elisa技術可以充分利用單克隆抗體的優點,并能利用某些非免疫反應試劑(如SPA、凝集素等)的作用,發展成為許多新方法。此外,發展Elisa技術還可以從酶及其底物兩方面著手。這是因為:*,用于Elisa技術的酶其種類遠遠多于可用作RIA檢測指示劑的放射性同位素。生物界的酶多種多樣,有希望開發很多類型的酶用于Elisa,并建立相應的Elisa方法。相反,自然界的化學元素是有限的,放射性同位素的種類更加有限。第二,由于酶的多樣性,酶作用底物也有多種多樣,與此相對應的生色源或供氫體的種類也有遠大的開發和發展潛力。
五、“"注意事項
1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。
5. 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數。
6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。