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ELISA實驗在做到嚴格要求的同時有著一些不能忽視的小細節：
1、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
4、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
    顯色系統也有很多，一開始做的時候，要選擇適宜的顯色系統。注意顯色系統酶活性底物的保存HRP結合物加硫柳泵，AP結合物可加疊氮鈉。
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 精密度：一般指其批內CV，其值應小于15%；定量試劑應同時考察線性范圍。
 安全性：指試劑對操作者和環境安全無害無傳染性。
 經濟性：試劑在同等質量條件下通過大規模生產或技術進步降低成本而市場價格比較合理。
    常因樣品采集、貯存、處理不當造成如樣品溶血，被細菌污染，標本凝集不全等。溶血標本，紅細胞溶解破裂，釋放出血紅素形成，而血紅素中的鐵卟啉是過氧化物酶的類似物，以HRP為標記的ELISA測定中，溶血標本可能會增加非特異性顯色。 
    把“”從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。