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本公司多年專業酶免服務，質量保證，可免費提供代測服務，一周內出結果。歡迎訂購：小鼠白介素4,小鼠白介素4 ELISA試劑盒

需要而未提供的試劑和器材
1、標準規格酶標儀
2、高速離心機
3、電熱恒溫培養箱
4、干凈的試管和Eppendof管
5、系列可調節移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時，用多通道移液器
6、蒸餾水，容量瓶等

“小鼠白介素4,小鼠白介素4 ELISA試劑盒”操作步驟：

實驗開始前，請提前配置好所有試劑，試劑或樣品稀釋時，均需混勻，混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時，用樣品稀釋液進行稀釋，以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。加樣時，槍頭應直接對準液面，切勿沿孔壁加樣。

為保證實驗結果有效性，每次實驗請使用新的標準品溶液。

1.棄去液體，甩干，不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl（取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制，輕輕混勻，在使用前一小時內配制），37℃,60分鐘。
2.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔，甩干。
3.每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液（同生物素標記抗體工作液）100μl，37℃，60分鐘。
4.溫育60分鐘后，棄去孔內液體，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分鐘，200μl/每孔，甩干。
5.依序每孔加底物溶液90μl，37℃避光顯色（30分鐘內，此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色，后3-4孔顯色不明顯，即可終止）。
6.依序每孔加終止溶液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性，底物反應時間到后應盡快加入終止液。
7.用酶聯儀在450nm波長依序測量各孔的光密度（OD值）。在加終止液后15分鐘以內進行檢測。

實驗備注：
1.用戶在初次使用試劑盒時，應將各種試劑管離心數分鐘，以便試劑集中到管底。
2.每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是zui后加底物溶液及終止液。測量時先用此孔調OD值至零。
3.為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。
4.未使用完的酶標板或者試劑，請于2-8℃保存。標準品、生物素標記抗體工作液、辣根過氧化物酶標記親和素工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的標準品、生物素標記抗體工作液、或辣根過氧化物酶標記親和素工作液。
5.建議檢測樣品時均設雙孔測定，以保證檢測結果的準確性。

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