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l 本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中大鼠5脂加氧酶(5-LOX)的含量。
l 有效期:6個月
l 保存條件:2-8℃
l 本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷
實驗原理
試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被大鼠5脂加氧酶(5-LOX)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的大鼠5脂加氧酶(5-LOX)呈正相關。用酶標儀在450nm 波長下測定吸光度(OD 值),計算樣品濃度。
5-LOX,大鼠5脂加氧酶酶聯免疫試劑盒技術指導操作步驟
(一)樣品準備
1.取動物全血按常規方法制備血清,要求血清清亮,無溶血、無污染。樣品1周內可于2~8℃保存,長期需置-20℃保存。
2.用樣品稀釋液將待檢血清按100倍稀釋(如2μl血清加入198μl樣品稀釋液中,混勻)。陰、陽性對照不用稀釋。
3.濃縮洗滌液使用前應恢復至室溫使沉淀溶解,然后用蒸餾水或去離子水作20倍稀釋。
(二)檢驗方法
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘,恢復至室溫。
2.取所需用量酶標板條,設空白對照1孔、陰性/陽性對照各2孔,未用的板條盡快密封,2~8℃保存。
3.空白對照孔加樣品稀釋液100μl;陰、陽性對照孔分別加入陰、陽性對照100μl;樣品孔每孔加入稀釋后的樣品100μl。
4.混勻,置37℃反應30分鐘。
5.扣去孔內液體,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,重復洗滌5次,拍干。
6.每孔加酶標記物100μl(空白孔除外)。置37℃反應30分鐘。
7.洗滌,同步驟5。
8.每孔依次加底物液A、底物液B各50μl,混勻,37℃避光反應10分鐘。
9.每孔加終止液50μl,混勻,用空白孔調零,于450nm(可用630nm作參比波長)測定各孔吸光值(A值)。
5-LOX,大鼠5脂加氧酶酶聯免疫試劑盒技術指導注意事項
1. 當混合蛋白溶液時應盡量輕緩,避免起泡。
2. 洗滌過程非常重要,不充分的洗滌易造成假陽性。
3. 一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。
5. 如標本中待測物質含量過高,請先稀釋后再測定,計算時請zui后乘以稀釋倍數。
6. 在配制標準品、檢測溶液工作液時,請以相應的稀釋液配制,不能混淆。
7. 底物請避光保存。
8. 不要用其它生產廠家的試劑替換試劑盒中的試劑。
ELISA試劑盒優點:
我司共有14000余種ELISA試劑盒物種涵蓋Human,Mouse,Rat等,品種具備以下優點:
*品質—高品質的抗體和試劑是ELISA試劑盒的基礎
精確特異—特異檢測目標分子,結果精確可重復
高度靈敏—可檢測到pg/mL級別的目標
種類齊全—可覆蓋人、大鼠、小鼠、棉鼠、獼猴、豬、馬、犬和貓等多個種屬
優化設計—可拆卸式96孔板(12X8),為血清、血漿、尿樣和細胞培養物樣本檢測進行優化
問題解答
Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照解析
Elisa試劑盒陰性對照及陽性對照:陰、陽性對照若有正確的結果,對試劑盒操作的結果可以有粗略的判斷。
空白對照:對ELISA試劑來說,空白對照實際上是不加標本不加酶做對照。空白對照主要測系統的吸光率。空白對照在單波長測量時顯得尤其重要
本公司代理幾千種ELISA試劑盒,數萬種抗體,并代理有品質產品近萬種,涉及分子生物學、分子免疫學、細胞生物學等生命科學研究的各個領域。為了節省您的時間,我們還可以提供代檢測服務。