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日本理化研究所日前宣布,其科研小組開發(fā)出一種檢測流感病毒的新技術(shù),靈敏度相對大幅提高,可在發(fā)病后的很早階段確認(rèn)感染,有助于及時防止流感蔓延. 日本理化研究所日前宣布,其科研小組開發(fā)出一種檢測流感病毒的新技術(shù),靈敏度相對大幅提高,可在發(fā)病后的很早階段確認(rèn)感染,有助于及時防止流感蔓延. 該小組的科研人員在新一期美國學(xué)術(shù)期刊《公共科學(xué)圖書館•綜合》的上報(bào)告說,此前的流感病毒檢測試劑是利用抗體辨別病毒的蛋白質(zhì),但如果發(fā)熱等感染癥狀未持續(xù)24小時,用這類方法就很難檢測出病毒,而且只能大體區(qū)分流感病毒屬于甲型還是乙型,對病毒的具體類型還需進(jìn)一步分析. 理化研究所開發(fā)的新技術(shù)把流感病毒的核糖核酸(RNA)轉(zhuǎn)變成脫氧核糖核酸(DAN),在試管中增殖后檢測.病毒濃度只需達(dá)到以往檢測濃度要求底限的百分之一即可,其類型可通過檢測基因確定.臨床試驗(yàn)顯示,新技術(shù)在患者發(fā)病后6至24小時內(nèi),即流感病毒尚未在人體內(nèi)大量增殖時就能測出病毒,且檢測的操作時間只需約40分鐘. 研究小組指出,利用這一技術(shù)能快速測出2009年流行的甲型H1N1流感病毒.目前,該小組正準(zhǔn)備嘗試以類似方法甄別H5N1型高致病性禽流感病毒,以期盡早發(fā)現(xiàn)更多種類的危險(xiǎn)流感病毒流行跡象,防止流感蔓延
| 禽流感病毒通用型RT-PCR檢測試劑盒 | | 10頭份/盒 |
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.標(biāo)本收集方法：
1. 血清：
室溫血液自然凝固10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
2. 血漿：
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
3. 尿液：
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：
檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5. 培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
6. 組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4)，或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。
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