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原代細胞分離的方法有多種,常用的是機械解離細胞法、酶學解離細胞法以及螯合劑解離細胞法,下面我們就介紹酶解聚方法獲得純化的原代細胞。(1)胰蛋白酶純化法●在去除不需要的組織后,使用無菌的解剖刀和剪子把剩余的組織切成3~4mm小片,通過懸浮在無鈣鎂的平衡鹽溶液中清洗組織碎片。讓組織碎片沉淀,去除上清液。重復清洗2到3次。●將盛有組織碎片的容器置于冰上,去除殘留的上清液。加入0.25%溶解在無鈣鎂的平衡鹽溶液中的胰蛋白酶(100mg組織加入1ml胰蛋白酶)。●在4℃孵育6到18小時,使幾乎沒有胰蛋白酶
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本試劑盒用于體外定量檢測血清、血漿、組織、細胞上清及相關液體樣本中小鼠促甲狀腺激素(TSH)的含量。有效期:6個月保存條件:2-8℃本試劑盒僅供體外研究使用,不用于臨床診斷實驗原理試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯免疫吸附試驗(ELISA)。往預先包被小鼠促甲狀腺激素(TSH)捕獲抗體的包被微孔中,依次加入標本、標準品、HRP標記的檢測抗體,經過溫育并*洗滌。用底物TMB顯色,TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的作用下轉化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的小鼠促甲狀腺激素(TSH)呈正相關
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細胞轉染是指將外源分子如DNARNA等導入真核細胞的技術。可分為瞬時轉染,穩定轉染等瞬時轉染是指外源DNA/RNA不整合到宿主染色體中,因此一個宿主細胞可存在多個拷貝數,產生高水平的表達,但通常只持續幾天,多用于啟動子和其他調控元件的分析。一般來說,超螺旋質粒DNA轉染效率較高,在轉染后24-72h內分析結果,常常用到一些報告系統如熒光蛋白,β半乳糖苷酶等來幫助檢測。穩定轉染是指外源DNA既可以整合到宿主染色體中,也可能作為一種游離體存在。盡管線性DNA比超螺旋DNA轉入量低但整合率高。外源DN
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關于ELISA酶免疫測定(enzymeimmunoassay)可分為均相(homogenous)和非均相(heterogenous)兩種類型。在均相EIA中可不需進行游離的和結合的標記物的分離而直接測定標記物。例如在某種條件下,抗原抗體反應后形成的酶標記抗原抗體復合物中的酶失去其對底物作用的活力,因而測出的酶活力直接反映游離的酶標記物。均相EIA在臨床檢驗中較少應用。非均相EIA需先進行游離的和結合的標記物的分離。如前所述,固相載體可用作一種分離手段。這種固相酶免疫測定方法在1971年最初建立時
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污染向來是在細胞培養中的大問題。預防或治理污染是細胞培養成功的關鍵因素。我們在細胞培養時,在開始階段就要十分重視污染問題,否則會前功盡棄,這樣不僅浪費時間,也會浪費人力、物力。(一)有哪幾類污染?在細胞培養過程中的污染不只是指微生物,而且還包括所有混入培養環境中的、對細胞生存有害或造成細胞不純的物質,包括生物和化學物質。1、細菌污染細菌污染是實驗室細胞培養中常見的污染,即使在細胞培養液中加入了抗菌素,也可能因為操作不慎而引起污染。見的有革蘭氏陽性菌,如枯草桿菌以及大腸桿菌、假單胞菌等革蘭氏陰性菌
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1.標本的采取和保存可用作ELISA測定的標本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標本以測定其中某種抗體或抗原成份。有些標本可直接進行測定(如血清、尿液),有些則需經預處理(如糞便和某些分泌物)。大部分ELISA檢測均以血清為標本。血漿中除尚含有纖維蛋白原和抗凝劑外,其他成份均同等于血清。制備血漿標本需借助于抗凝劑,而血清標本只要待血清自然凝固、xue塊收縮后即可取得。除特殊情況外,在醫學檢驗中均以血清作為檢測標本。在ELISA中血漿和血清可同等應用。血清標本
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一、參數規格產品名稱:人白細胞介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒使用說明書產品規格:48T96T價格:(具體優惠價格請咨詢業務員)供貨數量:150zui小起訂:1盒應用范圍:科研檢測詳細資料:實驗方法技術資料二、應用域ELISA法是免疫診斷中的項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查
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1.包被過程(注意設置空白對照,陰性對照):將所用抗原用包被稀釋液稀釋到適當濃度(一般所需抗原包被量為每孔20-200μg),每孔抗原加入100μl,置37℃,4h,或4℃,24h;棄去孔中液體.(為避免蒸發,板上應加蓋或將板平放在底部有濕紗布的金屬濕盒中)2.封閉酶標反應孔:5%小牛血清置37℃封閉40min.封閉時將封閉液加滿各反應孔,并去除各孔中的氣泡,封閉結束后用洗滌液滿孔洗滌3遍,每遍3min.洗滌方法:吸干孔內反應液,將洗滌液注滿板孔,放置2min略作搖動,吸干孔內液,傾去液體后在吸