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一般培養-保持胚胎干細胞處于未分化狀態培養基細胞復蘇凍存細胞明膠包被細胞傳代體外分化培養基包被有多聚鳥氨酸/纖維結合蛋白的培養板（使用或不使用蓋玻片）體外分化方法注：以下培養針對于小鼠的R1胚胎干細胞系，其它胚胎干細胞的培養可以參考。不過人的胚胎干細胞培養不可以采用下面的protocol，需要用的protocol和培養基。一般培養--維持ES細胞處于未分化狀態ES細胞培養用含有LIF（白血病抑制因子）和Feed細胞的培養基（高糖）來阻止細胞的分化。為細胞提供包被有0.1％明膠的平板作為粘附細胞的
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影響ELISA試驗效果常見問題原因分析及解決辦法來自Transhold跳轉到:導航,搜索ELISA試驗以靈敏度較高、特異性較好的特點在科研上得到了廣泛的應用，但操作中的各個環節對試驗的檢測效果影響較大，如不注意，有可能導致顯色不全、花板等結果。下面將操作中各個環節常出現問題的原因及解決辦法總結于下：操作步驟：目錄[隱藏]1選擇試劑：2標本收集與保存：3試劑使用中的準備工作及注意事項：4加樣：5溫育：6洗板：7顯色：8終止：9讀板：10全過程：11ELISA實驗的結果判斷和數據分析選擇試劑：選擇質
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免疫組化中抗體選擇要求1、一抗選擇要點（1）選擇單克隆還是多克隆抗體。由一種克隆產生的特異性抗體叫做單克隆抗體，單克隆抗體能目標明確地與單一特異抗原決定簇結合，就象導彈地命中目標一樣。另一方面，即使是同一個抗原決定簇，在機體內也可以由好幾種克隆產生抗體，形成好幾種單克隆抗體混雜物，稱為多克隆抗體。在抗原抗體反應中，一般單克隆抗體特異性強，但親和力相對小，檢測抗原靈敏度相對較低；而多克隆抗體特異性稍弱，抗體的親和力強，靈敏度高，但易出現非特異性染色（可以通過封閉等有所避免）。（2）種屬來源。一般家
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斐林試劑:成分:0.1g/mlNaOH（甲液）和0.05g/mlCuSO4（乙液）.用法:將斐林試劑甲液和乙液等體積混合,再將混合后的斐林試劑倒入待測液,水浴加熱或直接加熱,如待測液中存在還原糖,則呈磚紅色.班氏糖定性試劑:為藍色溶液.和葡萄糖混合后沸水浴會出現磚紅色沉淀.用于尿糖的測定.雙縮脲試劑:成分:0.1g/mlNaOH（甲液）和0.01g/mlCuSO4（乙液）.用法:向待測液中先加入2ml甲液,搖勻,再向其中加入3~4滴乙液,搖勻.如待測中存在蛋白質,則呈現紫色.蘇丹Ⅲ:用法:取蘇丹
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ELISA方法被廣泛應用于各種抗原和抗體測定。但ELISA測定中影響因素較多，而且其操作中有一定的技術要求，在檢測過程中除正常反應外，有時常見到一些錯誤的結果。引起ELISA測定錯誤結果的原因主要有：①標本因素；②試劑因素；③操作因素。下面就一些常見ELISA操作過程中的問題一一分析。1．樣品稀釋酶聯免疫反應是一種敏感性很高的反應，如果血清不稀釋，不可避免會產生很強的非特異性反應，出現假陽性。因此，國外檢測血清抗體的試劑盒，均規定將血清稀釋至適當的倍數，以降低非特異性反應，使特異性的抗原抗體反應
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酶標記物包括酶標記抗原、酶標記抗體和酶標記SPA等。酶標記物質量的好壞直接關系到免疫酶技術的成功與否，因此被稱為關鍵的試劑。酶標記物中zui常用的是酶標記抗體，它是將酶與特異性抗體經適當方法連接而成。酶標記抗體的質量主要取決于純度好、活性強及親和力高的酶和抗體，其次要有良好的制備方法。目前，高質量的酶（如辣根過氧化物酶，簡稱HRP）國內已有商品供應。高質量的抗體則可通過提取純化而獲得。在制備方法上，宜選用產率高、不影響結合物的活性和不混雜干擾性物質且操作簡便易行的方法。一、工作濃度的選擇在免疫酶
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1.1基本概念1.1.1質量控制（QuailityControl,Q.C）質量控制是監視全過程，排除誤差，防止變化，維持標準化現狀的一個管理過程。這一過程是通過一個反饋環路進行的。1）確定控制的對象；2）規定控制對象的標準（預期值）；3）制定或選擇控制方法和手段；3）測量實際數據；4）比較或較對實際數據與預期值之間的差異，并說明產生這一差異的原因。超出預定誤差范圍，報警系發出信號，反饋通道中斷。5）采取行動，解決差異?；謴驮瓲睿ㄔ瓨藴薁顟B）的手段發揮作用。質量控制主要采用質控圖進行。質控圖是把某
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小鼠二?；视停―AG/DG）ELISA試劑盒說明書預期應用ELISA法定量測定小鼠血清、血漿、組織勻漿或其它相關生物液體中DAG含量。實驗原理用純化的DAG抗體包被微孔板，制成固相載體，往微孔中依次加入標本或標準品、生物素化的DAG抗體、HRP標記的親和素，經過*洗滌后用底物（TMB）顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的DAG呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度（值），計算樣品濃度。試劑盒組成及試劑配制1、酶標板：一塊（
