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上海勁馬實驗設備有限公司專業(yè)經(jīng)營生命科學領域的研究試劑、儀器和實驗室消耗品，致力于向國內(nèi)生命科學研究人員提供*的產(chǎn)品和服務。 我們代理和經(jīng)銷的分子生物學試劑、生化試劑、免疫試劑、細胞培養(yǎng)試劑、制藥工業(yè)原料、實驗儀器與消耗品、臨床診斷產(chǎn)品等，已被廣泛應用于生命科學基礎與開發(fā)研究、制藥、疾病診斷、人口與健康、生物技術等諸多領域。我們的客戶遍布大學、研究所、醫(yī)院、制藥公司、生物技術公司和工業(yè)等單位。
1. 收到細胞株包裹時， 請檢查細胞株冷凍管是否有解凍情形， 若有請立即通知。細胞株請盡速開始培養(yǎng)， 或立即冷凍保存（置于–70 °C， 隔夜后， 移到liq N2）。
細胞復蘇的原則－快速融化：
必須將凍存在-196℃液氮中的細胞快速融化至37℃，使細胞外凍存時的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時進入細胞形成再結晶，對細胞造成損害。
具體操作
一. 實驗前準備：
1.將水浴鍋預熱至37℃
2.用75％酒精擦拭紫外線照射30min的超凈工作臺臺面。
3.在超凈工作臺中按次序擺放好消過毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等等。
二．取出凍存管：
1.根據(jù)細胞凍存記錄按標簽找到所需細胞的編號。
2.從液氮罐中取出細胞盒，取出所需的細胞，同時核對管外的編號。
三．迅速解凍：
1.迅速將凍存管投入到已經(jīng)預熱的水浴鍋中迅速解凍，并要不斷的搖動，使管中的液體迅速融化。
2.約1-2min后凍存管內(nèi)液體*溶解，取出用酒精棉球擦拭凍存管的外壁，再拿入超凈臺內(nèi)。
四.平衡離心：用架盤天平平衡后，放入離心機中3000r/min 離心3min
五.制備細胞懸液：
1.吸棄上清液。
2.向離心管內(nèi)加入10ml培養(yǎng)液，吹打制成細胞懸液。
六.細胞計數(shù)：細胞濃度以5×105/ml為宜。
七.培養(yǎng)細胞將復合細胞計數(shù)要求的細胞懸液分裝入培養(yǎng)瓶內(nèi)，將培養(yǎng)瓶放入37℃和5％CO2的培養(yǎng)箱內(nèi)2-4小時（或者24-48小時）后換液繼續(xù)培養(yǎng)培養(yǎng)，換液的時間由細胞情況而定
