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細胞培養技術作為現代生物醫學研究的重要手段，在生命科學、醫學研究、生物制藥等領域發揮著不可替代的作用。勁馬生物帶你了解細胞培養的基本概念、常用方法及注意事項。
一、細胞培養的基本概念
細胞培養技術是指從生物體內取出組織或細胞，在體外模擬體內生理環境，在無菌、適當溫度及酸堿度和一定營養條件下，使細胞生長繁殖并維持其結構和功能的一種重要技術。細胞培養技術主要包括細胞培養的類型、培養基、細胞的消耗物質、細胞培養的設備和細胞培養的步驟等幾個方面。
1. 細胞培養的類型
原代細胞培養：直接從體組織中分離出來的生物細胞進行培養。這種方法繁瑣且細胞數量和品質難以保證，因此在實驗室中較少使用。
繼代細胞培養：從已經培養的細胞中分離出來的細胞進行培養，是實驗室常用的方法。
2. 培養基
培養基是提供細胞分裂和生長所需營養物質的重要物質，通常由肝素、胰島素和細胞因子等多種化合物構成，以滿足不同類型細胞對營養物質的需求。
3. 細胞的消耗物質
細胞培養期間需要提供多種物質，包括抗生素(防止感染)、氣體(氧氣和二氧化碳保證正常生長)、酸堿指示劑(檢測培養基的酸堿度)等。
4. 細胞培養設備
細胞培養常用的設備包括培養箱(控制溫度、濕度和氧氣)、顯微鏡(觀察細胞形態和生長情況)、細胞培養板(培養細胞和收集細胞)等。
二、細胞培養的常用方法
1. 細胞傳代
細胞傳代是將健康細胞從舊培養基中轉移到新培養基中繼續增殖的過程。
具體步驟：
貼壁細胞：吸盡舊培養基，PBS清洗去除血清和死細胞，加入消化液消化細胞，待細胞收縮變圓或脫落后，加入充分培養基輕輕吹打，使細胞成單個懸浮，離心后重懸于新鮮培養基中繼續培養。
懸浮細胞：可直接將細胞原液分置新培養瓶中，加入充分培養基繼續培養。
2. 細胞復蘇
細胞復蘇是將凍存的細胞快速解凍并置于新培養基中培養的過程。
具體步驟：
準備適宜的培養基和血清。
將凍存管迅速放入37℃水浴中搖動至融化。
在無菌條件下，將細胞懸液轉移到含有全部培養基的培養瓶中，輕輕搖晃后置于培養箱中培養。
三、細胞培養的注意事項
1.無菌操作：無菌是體外培養細胞的首要條件，必須確保無菌工作區域、良好的個人衛生、無菌試劑和培養基以及無菌操作。
2.適宜的培養條件：包括溫度(一般為37℃)、pH值(7.2～7.4)、滲透壓(260～320mmol/L)等，這些條件對細胞的生長至關重要。
3.合適的培養基和血清：培養基和血清的種類和比例應根據細胞類型和實驗目的進行選擇。
4.定期觀察和記錄：定期觀察細胞生長情況，記錄細胞形態、密度和生長速度等指標，以便及時調整培養條件。
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